[发明专利]一种发根农杆菌介导的转基因植物的构建方法有效
申请号: | 201910132872.6 | 申请日: | 2019-02-22 |
公开(公告)号: | CN109679993B | 公开(公告)日: | 2020-11-27 |
发明(设计)人: | 杨清;孟冬;董碧莹;付玉杰;牛丽丽;宋治华 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H4/00 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 100000 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种发根农杆菌介导的转基因植物的构建方法,涉及植物基因工程技术领域,本发明所述方法首先构建带有目的基因的发根农杆菌,并使植物的无菌苗生根后进行栽种,当栽种后的无菌苗的茎长距根部超过3cm时,将带有目的基因的发根农杆菌的菌液注射至所述植物无菌苗的茎内;待茎部注射处生长出植物的转基因毛状根后,培养至转基因毛状根长度超3cm且根数多10根时,去除其非毛状根,并将毛状根伸入土壤,得毛状根转基因植物。与常规植物转基因体系相比,本发明的方法可省去植物愈伤细胞再分化步骤,克服利用愈伤细胞进行遗传转化存在的周期长等问题。本发明所述方法所需设备简单、操作技术容易掌握,具有广阔的开发应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 发根 杆菌 转基因 植物 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种发根农杆菌介导的转基因植物的构建方法,包括以下步骤:(1)将携带有目的基因的表达载体转化到发根农杆菌中,得到带有目的基因的发根农杆菌;(2)将植物的无菌苗接种在生根培养基上,培养得到生根的植物无菌苗,栽植;(3)当植物无菌苗的茎长距根部超过3cm时,将带有目的基因的发根农杆菌的菌液注射至所述植物无菌苗的茎内;所述注射的位置为植物无菌苗的茎距根部0.5~3cm处;(4)待茎部注射处生长出植物的转基因毛状根后,培养至转基因毛状根长度超过3cm且根数多于10根时,去除其非毛状根,并将毛状根伸入土壤,得到毛状根转基因植物;所述步骤(1)和(2)之间无顺序上的限定。
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