[发明专利]一种人的srebp1基因编码区全长分段克隆的方法有效
| 申请号： | 201910104768.6 | 申请日： | 2019-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN110157711B | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | 付常振;刘庆平;王仁军;路遥;兰佳欣 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/10 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 毕进 |
| 地址： | 116622 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人的srebp1基因编码区全长分段克隆的方法，该方法包括以下步骤：A1步骤，srebp1基因CDS区分段扩增PCR引物的设计；A2步骤，srebp1基因片段S1与S2的PCR扩增；A3步骤，S1与S2片段的克隆；A4步骤，T‑S1和T‑S2的双酶切与纯化；A5步骤，E‑S1与ET‑S2的片段的连接；本发明为srebp1基因的过表达、干扰序列筛选等以srebp1基因CDS区基因序列为基础的研究与应用提供一种有效的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 srebp1 基因 编码 全长 分段 克隆 方法 | ||
【主权项】：
1.一种人的srebp1基因编码区分段克隆的方法，其特征在于，包括以下步骤：A1步骤，srebp1基因CDS区分段扩增PCR引物的设计；A2步骤，srebp1基因片段S1与S2的PCR扩增；A3步骤，S1与S2片段的克隆；A4步骤，T‑S1和T‑S2的双酶切与纯化；A5步骤，E‑S1与ET‑S2的片段的连接；其中，A1步骤中，从GenBank中下载人srebp1mRNA序列，在CDS区的第2149‑2154位为BglII酶切位点，以此酶切位点为分界点，设计分段扩增引物，引物序列如下：①S1片段引物![]()
S1‑R：CAAGGCCCGTGGGAGACTGGTC②S2片段引物![]()
。
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