[发明专利]一种基于双极性脉冲电场诱导细胞融合的方法

摘要

本发明提出了一种基于双极性脉冲电场诱导细胞融合的方法，包括以下步骤：S1，将不同尺寸的细胞和融合液置于细胞培养槽内；S2，将正弦交流电压施加于细胞培养槽的两极，细胞将排队且彼此紧贴；S3，通过脉冲切换开关，将培养槽两极上所施加的正弦交流电压切换为双极性脉冲电压，槽内细胞发生微小电穿孔；S4，继续通过脉冲切换开关，将双极性脉冲电压切换为正弦电压，作用于已经处于穿孔状态的槽内细胞，己处于开孔状态的细胞上的孔进一步增大，彼此紧贴的两个细胞的外膜彼此连接，两细胞内遗传物质互相融合，最终形成一个完整的融合细胞。本发明相比于传统的单极性微秒脉冲细胞电融合，能够有效地提高细胞融合的成功率。

主权项

1.一种基于双极性脉冲电场诱导细胞融合的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，将不同或者相同尺寸的细胞和融合液置于细胞培养槽内；S2，将正弦交流电压施加于细胞培养槽的两极，细胞将排队且彼此紧贴；将正弦交流电压施加于细胞培养槽的两极的方法为：控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令，其中控制器向场效应管K8和场效应管K9发送导通命令，向其余场效应管发送截止命令；此时脉冲第二产生电路向负载电阻R2输出高频高压正弦交流电压；S3，通过脉冲切换开关，将培养槽两极上所施加的正弦交流电压切换为双极性脉冲电压，槽内细胞发生微小电穿孔；正弦交流电压切换为双极性脉冲电压的方法包括以下步骤：S31，控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令，其中，控制器向场效应管S1发送导通信号，向其余场效应管发送截止命令；电源S分别给电容C1～Cn充电；S32，控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令，其中控制器向场效应管S1～Sn、场效应管K2以及场效应管K5～K7发送导通命令，向其余场效应管发送截止命令；此时电容C1～Cn上的电荷通过负载电阻R2释放，在负载电阻R2上输出正极性的脉冲方波；S33，控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令，其中控制器向场效应管S1～Sn、场效应管K3～K4以及场效应管K6～K7发送导通命令，向其余场效应管发送截止命令；此时电容C1～Cn上的电荷通过负载电阻R2释放，在负载电阻R2上输出负极性的脉冲方波；S4，继续通过脉冲切换开关，将双极性脉冲电压切换为正弦电压，作用于已经处于穿孔状态的槽内细胞，己处于开孔状态的细胞上的孔进一步增大，彼此紧贴的两个细胞的外膜彼此连接，两细胞内遗传物质互相融合，最终形成一个完整的融合细胞；双极性脉冲电压切换为正弦电压的方法为：控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令，其中控制器向场效应管K8和场效应管K9发送导通命令，向其余场效应管发送截止命令；此时脉冲第二产生电路向负载电阻R2输出高频高压正弦交流电压；S5，当脉冲施加完毕后，控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令，其中控制器向场效应管S1～Sn以及场效应管K1发送导通命令，向其余场效应管发送截止命令，电容C1～Cn上残余的电荷通过放电电阻R1进行释放。