[发明专利]转导和扩增免疫细胞的方法及其用途在审
| 申请号： | 201880007383.1 | 申请日： | 2018-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN110234756A | 公开（公告）日： | 2019-09-13 |
| 发明（设计）人： | 格雷戈里·伊恩·弗罗斯特;詹姆斯·约瑟夫·奥努弗 | 申请（专利权）人： | F1肿瘤医学公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 | 代理人： | 肖善强 |
| 地址： | 美国佛*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了用于体外遗传修饰且扩增免疫细胞的方法，尤其用于基于细胞的过继性免疫疗法。因此，提供了用于转导免疫细胞(例如T细胞和/或NK细胞)的方法实施方式，其包括例如通过用诸如慢病毒颗粒的重组逆转录病毒颗粒转导该细胞来活化该细胞且遗传修饰该活化细胞的步骤。也提供了由这些方法产生的遗传修饰的细胞。此类方法通常在封闭系统内进行，且在说明性实施方式中为在封闭系统的单个腔室内进行。该方法通常包括：在封闭系统内，并且在说明性实施方式中为在封闭系统的单个腔室内，在细胞扩增培养基中扩增遗传修饰的免疫细胞。因此，在说明性实施方式中，本文提供了分批馈入单反应器方法系统。 | ||
| 搜索关键词： | 封闭系统 免疫细胞 遗传修饰 扩增 转导 细胞 过继性免疫疗法 重组逆转录病毒 室内 慢病毒颗粒 单反应器 方法实施 活化细胞 细胞扩增 培养基 活化 馈入 体外 | ||
【主权项】：
1.一种用于从分离血液中转导T细胞和/或NK细胞的方法，其包括：a)富集外周血单核细胞(PBMC)以从分离血液中分离包含T细胞和/或NK细胞的PBMC；b)在封闭系统的腔室内在有效条件下活化所分离的PBMC的T细胞和/或NK细胞，其包含有效量的抗CD3抗体和/或有效量的抗CD28；c)在有效条件下用非复制胜任型重组逆转录病毒颗粒转导所活化的T细胞和/或NK细胞，从而产生遗传修饰的T细胞和/或NK细胞；以及d)在细胞扩增培养基中将所述遗传修饰T细胞和/或NK细胞扩增至超过150ml的体积以及选自如下的扩增完成选择标准：乳酸浓度超过10mM、至少10倍扩增T细胞和/或NK细胞、和在细胞扩增培养基中至少4天，其中所述活化、转导和扩增在所述腔室内进行，而不在所述活化、转导和扩增之间或期间洗涤所述细胞。
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