[发明专利]一种禽减蛋综合征病毒培养方法及其在疫苗中的应用在审

专利信息
申请号: 201811638643.3 申请日: 2018-12-29
公开(公告)号: CN109593729A 公开(公告)日: 2019-04-09
发明(设计)人: 李延鹏;陈瑞爱;罗顺;蔡仕君;孙建军;温良海;谭银娟 申请(专利权)人: 肇庆大华农生物药品有限公司;华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司;华南农业大学;甘肃健顺生物科技有限公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;C12N7/02;A61K39/235;A61P31/20
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 肖宇扬;付静
地址: 526238 广东省肇*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种禽减蛋综合征病毒全悬浮培养方法,包括以下步骤:(1)在EB66悬浮传代细胞系中驯化禽减蛋综合征病毒,得到种毒;(2)将EB66细胞接种至生物反应器,使其在pH=7.20±0.1的条件下进行悬浮培养;(3)按禽减蛋综合征病毒与细胞培养基体积比2/1000的比例,将步骤(1)所得种毒接种EB66细胞,培养pH=7.40±0.1,在病毒效价达到最高时收获病毒液并保存。采用上述方法制得病毒液具有高纯度、高滴度的特点,将其灭活后制备的禽减蛋综合征疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
搜索关键词: 禽减蛋综合征病毒 减蛋综合征病毒 种毒 疫苗 传代 毒液 减蛋综合征 生物反应器 细胞培养基 病毒效价 细胞接种 悬浮培养 病毒液 高纯度 高滴度 全悬浮 体积比 驯化 可控 灭活 制备 生产工艺 接种 悬浮 细胞 保存 收获 应用
【主权项】:
1.一种禽减蛋综合征病毒全悬浮培养方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)按禽减蛋综合征病毒与细胞培养基体积比2/1000的比例接种EB66细胞,接毒后置于培养箱中悬浮培养,取HA效价最高时收获的病毒液进行传代,连续传代培养10代,得到种毒;(2)将EB66细胞接种至生物反应器,使其在pH=7.20±0.1的条件下进行悬浮培养;(3)按禽减蛋综合征病毒与细胞培养基体积比2/1000的比例,将步骤(1)所得所述种毒接种步骤(2)所述EB66细胞,培养pH=7.40±0.1,在病毒效价达到最高时收获病毒液并保存。
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