[发明专利]基于线虫表型指征的化学物毒性高通量筛检方法在审
| 申请号： | 201811572534.6 | 申请日： | 2018-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN109655605A | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 李国君;鲜波;高珊;陈维洋;张楠;敬海明;宁钧宇;曾迎新;张文静;娄云 | 申请（专利权）人： | 北京市预防医学研究中心 |
| 主分类号： | G01N33/50 | 分类号： | G01N33/50;G01N21/84 |
| 代理公司： | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 | 代理人： | 孙艳敏;杨敬 |
| 地址： | 100013 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了基于线虫表型指征的化学物毒性高通量筛检方法，包括以下步骤：S1：同步化线虫，得到都处于L1期的线虫；S2：将L1期线虫培养至L4期；之后，使用K‑medium溶液将NGM培养基上的L4期线虫冲洗至离心管中；S3：将L4期线虫的K‑medium溶液加入到384孔板中；在0h时在全自动倒置荧光相差显微镜下扫描384孔板并用CCD(电荷耦合装置)记录图像，之后向384孔板的每个孔内加入染毒溶液，分别在染毒后的多个时间段使用显微镜下扫描384孔板并用CCD(电荷耦合装置)记录图像；S4：处理数据，使用MATLAB图像处理软件对所拍摄的不同时间点的图像进行数据分析，得到不同时间点的线虫的表型指征。 | ||
| 搜索关键词： | 线虫 表型 电荷耦合装置 记录图像 高通量 化学物 时间点 显微镜 筛检 扫描 图像处理软件 并用 处理数据 染毒溶液 数据分析 线虫培养 培养基 倒置 染毒 离心管 时间段 同步化 荧光 冲洗 图像 拍摄 | ||
【主权项】：
1.基于线虫表型指征的化学物毒性高通量筛检方法，包括以下步骤：S1：同步化线虫，得到都处于L1期的线虫；S2：将步骤S1得到的L1期线虫培养至L4期，其中，将L1期线虫均匀滴在铺有细菌的NGM培养基上，培养30‑38小时，观察线虫，当线虫的身体一侧出现月亮斑时，得到L4期线虫；之后，使用K‑medium溶液将NGM培养基上的L4期线虫冲洗至离心管中；S3：将步骤S2得到的L4期线虫的K‑medium溶液加入到384孔板中；0h时在显微镜下扫描384孔板并用电荷耦合装置记录图像，对所述384孔板的每个孔采集5‑15帧图像并且保存图像，之后向384孔板的每个孔内加入染毒溶液，分别在染毒后的多个时间段使用显微镜下扫描384孔板并用电荷耦合装置记录图像，所述384孔板的每个孔采集5‑15帧图像并且保存图像；S4：处理数据，使用MATLAB图像处理软件对所拍摄的不同时间点的图像进行数据分析，得到不同时间点的线虫的表型指征。
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