[发明专利]一种柱前衍生-HPLC测定DXS酶催化活性的方法在审
| 申请号： | 201811495734.6 | 申请日： | 2018-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN109342634A | 公开（公告）日： | 2019-02-15 |
| 发明（设计）人： | 高文运;李恒;梁言菲;刘慧;刘楠;马圣博 | 申请（专利权）人： | 西北大学 |
| 主分类号： | G01N30/89 | 分类号： | G01N30/89;G01N30/06 |
| 代理公司： | 西安智邦专利商标代理有限公司 61211 | 代理人： | 胡乐 |
| 地址： | 710069 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种柱前衍生‑HPLC测定1‑脱氧‑D‑木酮糖5‑磷酸合酶(DXS)催化活性的方法，明确了1,2‑邻氨基苯(OPDA)及其类似物为适宜的衍生化试剂。DXS催化的1‑脱氧‑D‑木酮糖5‑磷酸(DXP)合成反应结束后，加入1,2‑邻氨基苯或其类似物对反应中剩余的反应底物丙酮酸、D‑甘油醛‑3‑磷酸进行衍生化，再以HPLC利用甲醇‑水或乙腈‑水为流动相进行梯度洗脱，紫外检测仪检测，然后通过计算反应体系中丙酮酸和/或D‑甘油醛‑3‑磷酸的消耗量来确定DXS的催化活性。本发明限定的衍生化试剂，衍生化反应条件温和，反应迅速，操作简单，HPLC检测灵敏度高，重现性好，检测结果准确。 | ||
| 搜索关键词： | 磷酸 衍生化试剂 催化活性 邻氨基苯 柱前衍生 丙酮酸 甘油醛 类似物 木酮糖 脱氧 酶催化活性 衍生化反应 紫外检测仪 反应底物 合成反应 检测结果 磷酸合酶 梯度洗脱 灵敏度 流动相 衍生化 重现性 消耗量 甲醇 乙腈 催化 检测 | ||
【主权项】：
1.1,2‑邻氨基苯(OPDA)及其类似物作为衍生化试剂以柱前衍生‑高效液相色谱法(HPLC)测定1‑脱氧‑D‑木酮糖5‑磷酸合酶(DXS)催化活性的用途。
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