[发明专利]一种利用水产品废弃物发酵制备生物表面活性剂的方法

摘要

本发明涉及一种利用水产品废弃物发酵制备生物表面活性剂的方法，包括(1)向鱼废中加入水、水解蛋白酶得到反应液，并进行水解反应；(2)将步骤(1)得到的鱼废水解液离心后提取上清液，然后将该上清液在‑80℃下冷冻48～72小时后放入冷冻干燥机中,再次冷冻干燥48～72小时后得到鱼蛋白胨；(3)配制种子培养基；(4)配制发酵培养基；(5)发酵培养；(6)提取生物表面活性剂。本发明公开的一种利用水产品废弃物发酵制备生物表面活性剂的方法具有以下有益效果：1、在避免鱼废造成环境污染的同时，提高了鱼废的经济效益；2、通过本方法制备的生物表面活性剂产量较传统方法生产的提高了15‑20％。

主权项

1.一种利用水产品废弃物发酵制备生物表面活性剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)向鱼废中加入水得到水解混合液，在向水解混合液中加入水解蛋白酶得到反应液，并对反应液进行水解反应，水解完成后得到鱼废水解液，然后进入步骤(2)，其中：鱼废与添加的水的质量比为1：(1～2)；水解时间为2～6小时；水解温度为45℃～65℃；反应液的pH为4～8；水解蛋白酶的添加量以水解混合液的质量计，添加量为10～40毫升/千克；(2)将步骤(1)得到的鱼废水解液离心后提取上清液，然后将该上清液在‑80℃下冷冻48～72小时后放入冷冻干燥机中,再次冷冻干燥48～72小时后得到鱼蛋白胨，完成后进入步骤(3)；(3)配制种子培养基向水中加入牛肉蛋白胨和NaCl，混合均匀后再在115～121℃，0.1～0.15MPa下灭菌40～50分钟,冷却后即得到种子培养基，该种子培养基的组成为：牛肉蛋白胨15g/L；NaCl 5g/L；余量为水；(4)配制发酵培养基向水中加入NaCl、FeSO4·7H2O、KH2PO4、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、ZnSO4、CaCl2、CuSO4、MnSO4、步骤(2)得到的鱼蛋白胨、蔗糖，搅拌混合均匀后调节pH至7，然后再在115～121℃，0.1～0.15MPa下灭菌40～50分钟,冷却后即得到发酵培养基，该发酵培养基的组成为：(5)发酵培养取一枯草芽孢杆菌的单独菌落接种到步骤(3)获得的种子培养基中培养24小时，将该种子培养基以体积比2％的接种量接入步骤(4)得到的发酵培养基中，并置于温度为25～35℃，转速为150～200rpm的摇床中培养96～120小时，得到发酵液；(6)提取生物表面活性剂(61)将步骤(5)得到的发酵液于8000rpm离心15分钟后取上清液，向该上清液中加入HCl调节pH至2，然后将该上清液静置8～12小时后离心，取下层沉淀物质，然后进入步骤(62)；(62)将步骤(61)得到的下层沉淀物质溶于甲醇中进行萃取，离心后收取上清液，重复萃取至少三次，合并上清液，其中：甲醇的用量与下层沉淀物质的质量计，其用量为10mL/g；(63)将步骤(62)合并后的上清液置于旋转蒸发仪中，以50～70rpm、35～40℃的条件下旋转蒸发去除有机溶剂，即得到生物表面活性剂。