[发明专利]一种磁性DNA水凝胶封装双酶的方法

摘要

一种磁性DNA水凝胶封装双酶的方法，属于固定化酶制备领域。本发明分为以下步骤：首先通过生物素功能化的单链DNA与未修饰的首尾交叉互补配对的单链DNA通过碱基互补配对制备长链DNA超分子结构；之后将DNA超分子结构与葡萄糖氧化酶、辣根过氧化物酶及磁性纳米粒子混合；加入链霉亲和素，通过链霉亲和素和生物素的相互作用实现酶和磁性纳米粒子的封装，进而制备磁性DNA水凝胶封装双酶体系。由于DNA水凝胶具有较好的生物相容性和生物源性及磁性纳米粒子的磁响应性，制备的固定化酶体系拥有较好的重复使用性、稳定性以及高酶活性，有利于酶的重复利用及回收，降低使用制备成本。

主权项

1.一种磁性DNA水凝胶封装双酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将生物素功能化修饰的单链DNA ssDNA1与未修饰的单链DNA ssDNA2溶于缓冲溶液中，混合溶液在95℃反应5min，反应后的混合溶液室温冷却4h制备长链DNA超分子结构；生物素与ssDNA1的摩尔比为1:1；ssDNA1和ssDNA2摩尔比为1:1；ssDNA1和ssDNA2为首尾交相互补配对构成DNA超分子结构；(2)将(1)中合成的DNA超分子结构与磁性纳米粒子、葡萄糖氧化酶及辣根过氧化物酶混合30min，混合液中加入链霉亲和素反应24h，合成磁性DNA水凝胶封装双酶体系；辣根过氧化物酶和葡萄糖氧化酶摩尔比为2:1，链霉亲和素和生物素的摩尔比为1:2；DNA超分子结构与磁性纳米粒子、葡萄糖氧化酶的摩尔比为1:239:22。