[发明专利]百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法

摘要

本发明提供百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法，包括百合胚珠挽救及愈伤诱导、丛生芽的诱导、仔球的分化及膨大、变温处理相变诱导和再生植株移栽等步骤。与传统的仔球未经童期相变处理的百合组培技术相比，传统方法一般需要3年及以上时间方可培养成大球或开花，本发明方法可使百合种球在相对短的时间内(两年左右便可开花)大规模繁殖出遗传背景完全相同、外观整齐的植株，再生植株变异低，再生体系高效；平均单株再生苗的成本极低，适合在百合杂交后采收杂交种子，将杂交种子的胚珠作为外植体，提高百合新品种选育的效率，以及大批量高效快速繁殖新品种的百合种球，非常适合于工厂化生产。

主权项

1.百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、百合胚珠挽救及愈伤诱导：从百合杂交后代果实中收集胚珠，消毒处理后用刀沿着纵向划破胚珠的珠被，然后接种在含6‑BA 0.8～1.0mg/L、NAA 0.3～0.5mg/L和蔗糖30～45g/L，pH值5.5～6.5的MS培养基上，培养至长出黄绿色愈伤或丛生苗；B、丛生芽的诱导：将步骤A的黄绿色愈伤或丛生苗转接到诱导分化培养基上进行培养，诱导产生丛生芽；所述诱导分化培养基为：MS+6‑BA 0.8～1mg/L+NAA 0.5～0.6mg/L+蔗糖30～45g/L，pH值5.5～6.5；C、仔球的分化及膨大：从步骤B的丛生芽中切下芽头，将芽头纵切，一分为二，再将切分好的半个芽头转接到仔球分化及膨大培养基中，培养至每个材料离体分化出2～4粒小仔球；所述仔球分化及膨大培养基为：MS+6‑BA 0.1mg/L+NAA 0.1～0.15mg/L+蔗糖90～120g/L，pH值5.5～6.5；D、变温处理相变诱导：将步骤C分化出的小仔球转移到11～15℃条件下暗处理5～6周；然后于4℃条件下暗处理10周；E、再生植株移栽：将步骤D经处理后的仔球转移到温室中适应2周后，移栽至基质中培养，直至仔球出芽，出芽后继续在基质中培养一年，之后移栽大田，常规种植管理；所述基质为草炭：蛭石：细沙体积比2:1:1，或草炭：蛭石：珍珠岩体积比2:1:1。