[发明专利]一种对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法在审
| 申请号： | 201811387077.3 | 申请日： | 2018-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN109457012A | 公开（公告）日： | 2019-03-12 |
| 发明（设计）人： | 黄永相;李伟;郭建夫;李东;祝敏丹 | 申请（专利权）人： | 广东海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/04;C12Q1/686;C12R1/645 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈伟斌;刘瑶云 |
| 地址： | 524013 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：从水稻发病的植株上单独将病斑切取下来或者挑取稻瘟病菌的菌丝定量的放入试管中，然后将DNA提取缓冲液注入试管中，将试管放入湿热灭菌锅中进行水浴处理，时长10min‑12min，将水浴处理后的试管进行自然冷却后，导入相应的过滤装置中进行过滤，将过滤后的混合液定量均匀的注入PCR‑96孔板内安置到‑20℃的环境下进行冷藏，检测装置的探针对PCR‑96孔板内的混合液进行数据采集，通过与计算机自动生成DNA检测数据表。该对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法，提高了稻瘟病基因提取工作的可控性，减少基因提取工作的意外状况的发生，保证稻瘟病基因提取工作的稳定高效。 | ||
| 搜索关键词： | 稻瘟病基因 试管 提取检测 水稻 水浴处理 放入 过滤 混合液定量 菌丝 稻瘟病菌 过滤装置 基因提取 检测装置 湿热灭菌 数据采集 自动生成 植株 混合液 可控性 病斑 切取 时长 冷藏 计算机 安置 保证 | ||
【主权项】：
1.一种对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提前准备好DNA提取缓冲液；（2）从水稻发病的植株上单独将病斑切取下来或者挑取稻瘟病菌的菌丝，定量的放入试管中；（3）然后定量的将准备好DNA提取缓冲液注入带有植株病斑或者稻瘟病菌菌丝的试管中；（4）将上述带有植株病斑或者稻瘟病菌菌丝的试管放入湿热灭菌锅中进行水浴处理，时长10min‑12min；（5）将水浴处理后的试管放置到常温状态下进行自然冷却；（6）试管内的混合液经自然冷却后，导入相应的过滤装置中进行过滤，从而过滤掉混合液中残留的固态杂质；（7）将过滤后的混合液定量均匀的注入PCR‑96孔板内，再将带有混合液的PCR‑96孔板安置到‑20℃的环境下进行冷藏，以供后续检测使用；（8）检测时取出PCR‑96孔板，检测装置的探针上标记酶、生物素、放射性同位素，探针对PCR‑96孔板内的混合液进行数据采集，通过与计算机内的DNA检测系统的标准对照表进行对比，计算对比度，自动生成DNA检测数据表。
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