[发明专利]交叉引物扩增结合纳米生物传感器和AUDG检测核酸的方法有效
| 申请号： | 201811371238.X | 申请日： | 2018-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN109457013B | 公开（公告）日： | 2022-01-11 |
| 发明（设计）人： | 申阿东;王毅;孙琳;李洁琼 | 申请（专利权）人： | 北京大爱江河生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京市众天律师事务所 11478 | 代理人： | 李新军 |
| 地址： | 100176 北京市大兴区北京经济技*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种交叉引物扩增技术结合纳米生物传感器和AUDG检测核酸的方法，所述方法的交叉引物扩增体系中不仅有前置换引物4s、核心交叉引物2s、扩增引物3a、扩增引物1a、后置换引物5a，以及上述引物任选其一标记半抗原的引物，并在生物素化的dCTP、南极热敏尿嘧啶脱氧核酸糖基化酶的存在下进行恒温扩增，最后使用包被有亲和素化高分子纳米粒子的生物传感器检测扩增产物。本发明还提供了一组用于上述方法检测肺炎克雷伯菌的rcsA基因的一组核苷酸序列引物组合。本发明提供的方法简便、快速、能够有效去除交叉污染，具有优异的灵敏度，最低可检测到2×10 |
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| 搜索关键词： | 交叉 引物 扩增 结合 纳米 生物 传感器 audg 检测 核酸 方法 | ||
【主权项】：
1.一种交叉引物扩增技术结合纳米生物传感器和AUDG检测核酸的方法，所述方法包括以下步骤：(1)提取待检测样品的核酸；(2)提供前置换引物4s、核心交叉引物2s、扩增引物3a、扩增引物1a以及后置换引物5a，另外，还提供在5’端被标记半抗原的上述任选的一种引物，命名为4s*、2s*、3a*、1a*或者5a*；(3)在南极热敏尿嘧啶脱氧核酸糖基化酶、链移位型DNA聚合酶Bst、引物、dNTP，以及生物素化的dCTP存在下，使用待检测样品的核酸作为模板进行交叉引物扩增DNA；(4)使用包被有亲和素化高分子纳米粒子的生物传感器检测步骤(3)的扩增产物。
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