[发明专利]一种检测牛环曲病毒的试剂盒及RT-PCR检测方法在审
| 申请号： | 201811316458.2 | 申请日： | 2018-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN109207642A | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 师志海;兰亚莉;王璟;王文佳;焦文强;徐照学;孟红丽;王亚州 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 郑州明华专利代理事务所(普通合伙) 41162 | 代理人： | 王明朗 |
| 地址： | 450000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测牛环曲病毒的试剂盒，该试剂盒包含检测牛环曲病毒的引物、RNA提取试剂、反转录试剂、阳性对照和阴性对照，所述引物的核苷酸序列为上游引物P1：5’‑GGTGCCGTTGTTGTGTCA‑3’，下游引物P2：5’‑CAGCCCTGAGTTGCCTTATC‑3’；阳性对照为BCoV，BNoV，BAstV，BRV，BVDV和BKV，阴性对照为无菌双蒸水。本发明还公开了一种检测牛环曲病毒的RT‑PCR方法，步骤如下：（1）合成上述用于检测牛环曲病毒的引物；（2）提取待测样品中的RNA，以提取的RNA为模板反转录得到其cDNA；（3）以步骤（2）制得的cDNA为模板，采用步骤（1）合成的引物组进行PCR扩增反应；（4）分析PCR扩增产物。简便实用、经济高效，可以大大提高检测效率，节约检测时间。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒 试剂盒 检测 引物 阳性对照 阴性对照 种检测 合成 反转录试剂 无菌双蒸水 待测样品 核苷酸序 上游引物 下游引物 反转录 引物组 节约 分析 | ||
【主权项】：
1.一种用于牛环曲病毒PCR检测的特异性引物，其特征在于，所述引物是根据牛环曲病毒刺突糖蛋白基因序列的高度保守区域设计的，其核苷酸序列如下所示：上游引物P1：5’‑GGTGCCGTTGTTGTGTCA‑3’下游引物P2：5’‑CAGCCCTGAGTTGCCTTATC‑3’。
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