[发明专利]冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法

摘要

本发明公开了一种冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法，以正常人红细胞为原料直接制备低水平糖化血红蛋白质控品；再以正常人或糖尿病患者红细胞为原料，通过离子亲和层析法制备高浓度、高纯度的HbA1c，取一定量纯化的HbA1c添加到低水平质控品中，得到高水平糖化血红蛋白质控品；最后将低水平和高水平质控品按比例混合，调配得到中水平糖化血红蛋白质控品，然后分别加入一定量防腐剂和冻干保护剂，通过真空冷冻干燥即得到性质稳定的低、中、高冻干态糖化血红蛋白质控品。本发明方法简单，三水平梯度明显，涵盖正常值和医学决定水平处；低水平原料方便易获取，高水平原料采用离子交换层析法制得，纯度高；制备的高、中、低三个水平质控品性质稳定。

主权项

1.一种冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：包括低水平冻干态糖化血红蛋白质控品、高水平冻干态糖化血红蛋白质控品和中水平冻干态糖化血红蛋白质控品的制备，其中低水平冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法如下：第一步，取正常人全血5ml，先采用2000‑4000 rpm/min转速在离心机上离心5‑20min，然后弃上清，得下层红细胞；第二步，按体积比1:10加入磷酸盐缓冲液洗涤，并按照与第一步相同的转速离心，反复洗涤2‑5次，弃上清，得下层洗涤后的红细胞；第三步，下层红细胞按体积比10:1~1:10加入磷酸盐缓冲液进行保存，采用D‑10血红蛋白测试系统测定HbA1c结果为5.3%，峰面积为206万µvolt•秒，得到低水平糖化血红蛋白质控品，然后加入1‰庆大霉素和5%海藻糖，分装后采用真空冷冻干燥技术进行冻干，得到低水平冻干态糖化血红蛋白质控品，贮存于2‑8℃；高水平冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法如下：以正常人或糖尿病患者红细胞为原料，采用离子亲和层析法制备纯度大于70%的高浓度HbA1c，然后取一定量纯化的HbA1c添加到上述制备的低水平糖化血红蛋白质控品中，通过D‑10血红蛋白测试系统测定HbA1c结果为14.8%，峰面积为296万µvolt•秒，得到高水平糖化血红蛋白质控品，然后加入1‰庆大霉素和5%海藻糖，分装后采用真空冷冻干燥技术进行冻干，得到高水平冻干态糖化血红蛋白质控品，贮存于2‑8℃；将上述制备的低水平糖化血红蛋白质控品和高水平糖化血红蛋白质控品按一定比例混合，采用D‑10血红蛋白测试系统测定HbA1c结果为9.7%，峰面积为284万µvolt•秒，得到中水平糖化血红蛋白质控品，然后加入1‰庆大霉素和5%海藻糖，分装后采用真空冷冻干燥技术进行冻干，得到中水平冻干态糖化血红蛋白质控品，贮存于2‑8℃。