[发明专利]CEA与dbpA双标记结直肠癌检测试剂的制备方法及使用方法在审
| 申请号： | 201811190720.3 | 申请日： | 2018-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN109116026A | 公开（公告）日： | 2019-01-01 |
| 发明（设计）人： | 刘瑞廷;王国荣 | 申请（专利权）人： | 刘瑞廷 |
| 主分类号： | G01N33/574 | 分类号： | G01N33/574 |
| 代理公司： | 西安东灵通专利代理事务所(普通合伙) 61242 | 代理人： | 朱玲 |
| 地址： | 710000 陕西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明属于结直肠癌早期检测领域，具体涉及CEA与dbpA双标记结直肠癌检测试剂的制备方法及使用方法。包括以下步骤：1)用缓冲液稀释CEA‑BSA和dbpA‑BSA的包被原，加入到96孔板中，过夜，弃包被液，加入封闭液，封闭，弃掉封闭液，洗涤，真空抽干，冷冻保存；2)将步骤1)中产物加入带有滤膜的离心管中离心，再用缓冲液重复洗涤多次，与标记试剂充分混匀，振荡过夜；3)将步骤2)中产物分离纯化，用洗脱液洗脱，同时收集流出液，逐管测量吸光度，测定蛋白含量，根据所述标记试剂的说明书所提供的公式测定标记率和蛋白回收率。本技术方案以双抗夹心法，建立同时检测CEA和dbpA的双标记时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)法，为结直肠癌快速准确检测提供新的理念和方法。 | ||
| 搜索关键词： | 结直肠癌 双标记 标记试剂 检测试剂 封闭液 缓冲液 制备 洗涤 时间分辨免疫荧光分析 蛋白回收率 双抗夹心法 产物分离 冷冻保存 早期检测 准确检测 包被液 包被原 标记率 离心管 流出液 吸光度 洗脱液 真空抽 振荡 混匀 滤膜 稀释 洗脱 蛋白 测量 封闭 检测 重复 | ||
【主权项】：
1.CEA与dbpA双标记结直肠癌检测试剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)用缓冲液稀释CEA‑BSA和dbpA‑BSA的包被原，加入到96孔板中，过夜，弃包被液，加入封闭液，封闭，弃掉封闭液，洗涤，真空抽干，冷冻保存；2)将步骤1)中产物加入带有滤膜的离心管中离心，再用缓冲液重复洗涤多次，与标记试剂充分混匀，振荡过夜；3)将步骤2)中产物分离纯化，用洗脱液洗脱，同时收集流出液，逐管测量吸光度，测定蛋白含量，根据所述标记试剂的说明书所提供的公式测定标记率和蛋白回收率。
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