[发明专利]一种牛大力的培育方法

摘要

本发明公开了一种中药牛大力的培育方法，该方法选取牛大力半木质化茎段的嫩枝作为外植体，进行组织培育得到粗壮优质的牛大力组培苗，随后进行营养培育促进其壮大生根后再移栽大田；该方法组培原料成本低，且能在较短时间内培育出无毒优质的幼苗，还不受气候等自然环境的影响。对外植体使用过氧化氢和升汞液进行消毒，组织褐化率低，而且消毒彻底，后续培育过程污染低；组培过程使用的培养基成分简单，成本低，幼苗对环境的适应能力强，每次移栽的存活率高，使用过的废弃培养基还能再次利用，既提高资源的利用率又保护环境。

主权项

1.一种牛大力的培育方法，其特征在于，所述培育方法包括以下步骤：（1）外植体消毒：选取牛大力半木质化茎段的嫩枝，先用清水冲洗干净，然后剪成长0.5‑1.0 cm的小茎段，用滤纸吸干表面水分，在3%的过氧化氢溶液中灭菌60s，用无菌水清洗2次，无菌纸吸干表面水分，置于0.1%的升汞液中浸泡灭菌12 min，用无菌水清洗5次，无菌纸吸干表面水分；（2）诱导培育：将消毒后的外植体移入诱导培养基中诱导分化，培育条件：温度为23‑27℃，光照时间为12 h/天，光照强度为1600‑2000lx；诱导培养基为：MS +蔗糖 20g/L +卡拉胶 4g/L +6‑BA 2mg/L +KT 1mg/L +NAA 0.4mg/L +AC 1g/L，pH值为5.8；（3）增殖培育：当侧芽分化芽长至3cm时，将嫩芽剪下转入增殖培养基中进行继代增殖培育，培育条件：温度为23‑27℃，光照时间为12 h/天，光照强度为1600‑2000lx；增殖培养基：MS +蔗糖 20g/L +卡拉胶 4g/L +6‑BA 3mg/L +IAA 0.2mg/L +NAA 0.8mg/L，pH值为5.8；（4）生根培育：当增殖芽长至3cm时，将嫩芽剪下浸泡在50mg/L的IBA溶液中5s，再接入生根培养基上诱导生根，培育条件：温度为23‑27℃，光照时间为12 h/天，光照强度为1600‑2000lx；生根培养基为：1/2MS +蔗糖 20g/L +卡拉胶 4g/L +AC 0.5g/L，pH值为5.8；（5）驯化移栽：生根培养30天后，将生根组培苗的瓶塞打开在室内放置3‑5天，取出组培苗用1‰浓度的高锰酸钾溶液洗净根部培养基，随后移栽到蛭石：营养土=1：3的基质中，并用水浇透，搭小拱棚进行保温保湿，温度控制在20‑30℃之间，相对湿度保持在85%以上，5天后在小拱棚的塑料膜上面每隔10cm戳一个直径为1mm的小孔，15天后在小拱棚的塑料膜上面每隔20cm戳一个直径为5mm的孔，将25天后原来直径为5mm的孔扩大至1cm，35天后将小拱棚拆除。