[发明专利]一种牛大力的培育方法

说明书

本发明公开了一种中药牛大力的培育方法，该方法选取牛大力半木质化茎段的嫩枝作为外植体，进行组织培育得到粗壮优质的牛大力组培苗，随后进行营养培育促进其壮大生根后再移栽大田；该方法组培原料成本低，且能在较短时间内培育出无毒优质的幼苗，还不受气候等自然环境的影响。对外植体使用过氧化氢和升汞液进行消毒，组织褐化率低，而且消毒彻底，后续培育过程污染低；组培过程使用的培养基成分简单，成本低，幼苗对环境的适应能力强，每次移栽的存活率高，使用过的废弃培养基还能再次利用，既提高资源的利用率又保护环境。

技术领域

本发明属于植物培育种植技术领域，具体是一种中药牛大力的培育方法。

背景技术

牛大力（Millettia specisoa Champ.），别名猪脚笠、金钟根、山莲藕、倒吊金钟、大力薯；为豆科崖豆藤属植物——美丽崖豆藤。牛大力是一种分布于热带和亚热带地区的野生名贵药材，以根入药，主要成分为蛋白质、淀粉质及生物碱等。味甘、性平，归肺、肾经；具有补虚润肺、强筋活络的功效。用于腰肌劳损，风湿性关节炎，肺热，肺虚咳嗽，肺结核，慢性支气管炎，慢性肝炎，遗精，白带。70年代，牛大力作为壮腰健肾丸、强力健身胶囊等的原料而用于中成药的生产，在两广地区得到广泛应用。同时，牛大力又是一个多民族使用的民间草药，贾敏如的《中国民族药志要》中记载牛大力是仫佬药、壮药等。近年来，牛大力遭受滥采滥挖，野生资源几近灭绝。国内学者已经采用植物组培技术快速繁殖牛大力，但仍未解决现阶段市场对牛大力的需求。

专利CN201810094607-一种提高牛大力产量的种植方法公开了使用牛大力茎段作为外植体培育牛大力幼苗；诱导培养基为MS培养基加入蔗糖30g/L、琼脂6g/L和玉米素0.3mg/L；增殖培养基为MS培养基加入蔗糖50g/L、琼脂10g/L、萘乙酸0.2mg/L和赤霉素0.2mg/L；生根培养基为MS培养基加入蔗糖60g/L、琼脂15g/L、磷酸二氢钠6g/L、硝酸铵8g/L、萘乙酸0.5mg/L和玉米素0.6mg/L；该专利在组培过程中杀菌剂成分复杂、培养基含糖量高，废弃培养基难处理。专利CN201710767249-一种牛大力的培育方法公开了采用牛大力的种子进行组织培养培育出牛大力幼苗，但是牛大力的种子价格较高，导致培育成本较高。

发明内容

本发明的目的是提供一种牛大力的培育方法，通过该方法可以培育出优质、高产的牛大力产业化组培苗，缓解了市场对牛大力供不应求的现状，而且经过筛选出最佳的牛大力组培种植技术，为建立牛大力组培技术产业化标准奠定了基础。

一种牛大力的培育方法，包括以下步骤：

（1）外植体消毒：选取牛大力半木质化茎段的嫩枝，先用清水冲洗干净，然后剪成长0.5-1.0 cm的小茎段，用滤纸吸干表面水分，在3%的过氧化氢溶液中灭菌60s，用无菌水清洗2次，无菌纸吸干表面水分，置于0.1%的升汞液中浸泡灭菌12 min，用无菌水清洗5次，无菌纸吸干表面水分。

（2）诱导培育：将消毒后的外植体移入诱导培养基中诱导分化，培育条件：温度为23-27℃，光照时间为12 h/天，光照强度为1600-2000lx；诱导培养基为：MS +蔗糖 20g/L +卡拉胶 4g/L +6-BA 2mg/L +KT 1mg/L +NAA 0.4mg/L +AC 1g/L，pH值为5.8。

（3）增殖培育：当侧芽分化芽长至3cm时，将嫩芽剪下转入增殖培养基中进行继代增殖培育，培育条件：温度为23-27℃，光照时间为12 h/天，光照强度为1600-2000lx；增殖培养基：MS +蔗糖 20g/L +卡拉胶 4g/L +6-BA 3mg/L +IAA 0.2mg/L +NAA 0.8mg/L，pH值为5.8。