[发明专利]一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用。该试纸条包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的异菌脲单克隆抗体，硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，检测区喷涂有异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物，质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体，异菌脲半抗原是由3,5‑二氯苯异氰酸酯与甘氨酸乙酯盐酸盐、6‑氨基己酸甲酯盐酸盐等经过一系列反应得到。本发明提供的试纸条和检测方法具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低的优点，能实现对大批量样品中异菌脲的快速检测。

主权项

1.一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条，包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于所述结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的异菌脲单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，所述检测区喷涂有异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物，所述质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体；所述异菌脲单克隆抗体是以异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物是由异菌脲半抗原与载体蛋白偶联得到，所述异菌脲半抗原是由3,5‑二氯苯异氰酸酯与甘氨酸乙酯盐酸盐反应生成2‑(3‑(1,5‑二氯苯基脲基))乙酸乙酯，水解得到2‑(3‑(1,5‑二氯苯基脲基))乙酸，再经过成环反应，得到3‑(3,5‑二氯苯基)‑2,4‑咪唑烷基二酮，再与6‑氨基己酸甲酯盐酸盐与三光气反应得到的6‑异氰酸基己酸甲酯反应生成6‑(3‑(3,5‑二氯苯基)‑2,4‑二氧咪唑烷基‑1‑甲酰胺基)己酸甲酯，最后在酸性条件下水解得到，其分子结构式为：。