[发明专利]一种利用琼脂测定细菌纤维素合成过程中葡萄糖传质的方法在审

专利信息
申请号: 201811098605.3 申请日: 2018-09-20
公开(公告)号: CN109182187A 公开(公告)日: 2019-01-11
发明(设计)人: 钟成;李思琦;张艳文;贾士儒;谢燕燕 申请(专利权)人: 天津科技大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P19/04;C12Q1/54;C12R1/02
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 300457 天津*** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明一种利用琼脂测定细菌纤维素合成过程中葡萄糖传质的方法,属于微生物发酵领域,包括以下步骤:(1)配置不同琼脂浓度的发酵培养基,将活化后的木葡糖酸醋杆菌接种于接种到不同浓度琼脂培养基中,放入30℃恒温培养箱中静置培养7d。(2)每隔24h分别取样测定不同浓度琼脂培养基不同位置的葡萄糖浓度。(3)细菌纤维素的提取。将恒温静置培养后生成的细菌纤维素膜取出后,用水多次冲洗,除去膜表面培养基及杂质,至膜呈乳白色半透明,pH值接近中性。本发明利用不同琼脂浓度形成BC合成过程中的葡萄糖传质阻力,既简单易行,又可以广泛应用。本发明原材料都简单易得,安全无毒,且操作简单,应用价值极高。
搜索关键词: 葡萄糖 琼脂 细菌纤维素 合成过程 培养基 浓度琼脂 传质 接种 木葡糖酸醋杆菌 细菌纤维素膜 发酵培养基 恒温培养箱 微生物发酵 传质阻力 恒温静置 静置培养 半透明 膜表面 乳白色 放入 活化 取样 冲洗 应用 无毒 取出 配置 安全
【主权项】:
1.一种利用琼脂测定细菌纤维素合成过程中葡萄糖传质的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)液体培养基的配制(g/L):葡萄糖25,酵母粉7.5,蛋白胨10,Na2HPO4 10,冰醋酸调节初始pH 6.0,121℃灭菌20min。(2)0.3%琼脂培养基的配制(g/L):葡萄糖25,酵母粉7.5,蛋白胨10,Na2HPO4 10,琼脂3,冰醋酸调节初始pH 6.0,121℃灭菌20min。(3)0.6%琼脂培养基的配制(g/L):葡萄糖25,酵母粉7.5,蛋白胨10,Na2HPO4 10,琼脂6,冰醋酸调节初始pH 6.0,121℃灭菌20min。(4)木葡糖酸醋杆菌的活化,在固体培养基平板上挑取木葡糖酸醋杆菌单菌落于150mL新鲜的液体培养基中,30℃,180r/min振荡培养24h,再将种子液转接于150mL新鲜的液体培养集中30℃,180r/min振荡培养。(5)木葡糖酸醋杆菌的发酵培养,按照体积比4%的接种量把种子液接种到不同浓度琼脂培养基中,放入30℃恒温培养箱中静置培养7d,每隔24h分别取样测定BC产量和培养基不同位置(从上至下(0cm、2cm、4cm、6cm、8cm))的葡萄糖浓度。(6)细菌纤维素提取和处理方法,将恒温静置培养7天后生成的细菌纤维素膜取出后,用水多次冲洗,除去膜表面培养基及杂质,至膜呈乳白色半透明,pH值接近中性。
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