[发明专利]一种香蕉离体茎尖超低温保存方法在审
| 申请号： | 201811054371.2 | 申请日： | 2018-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN109221094A | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 陈晓玲;李俊慧;卢新雄;辛霞;张金梅;尹广鵾;何娟娟 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | A01N3/00 | 分类号： | A01N3/00 |
| 代理公司： | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人： | 包晓静 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于香蕉低温保存技术领域，公开了一种香蕉离体茎尖超低温保存方法，将3.0～6.0cm高香蕉苗，在含0.4mol/L蔗糖培养基中预培养2d；室温条件下，剥取带1～2个叶原基的茎尖；茎尖经装载液装载后，用玻璃化溶液处理，在铝箔条上做成小滴；液氮中保存至少1h，用1.2mol/L蔗糖培养液化冻和洗涤，每次洗涤10min；将经上述处理的茎尖转到含0.3mol/L蔗糖MS培养基，暗室培养2d，转移到含0.5mg/L 6‑BA的MS培养基中，培养30～35d，将恢复正常生长的种源接种到新的恢复生长培养基中进行增殖快繁，得丛生芽，生根培养基中培养。在液氮中长期保存，为香蕉种质的安全保存提供有效途径。 | ||
| 搜索关键词： | 香蕉 茎尖 超低温保存 离体茎尖 液氮 保存 洗涤 恢复生长培养基 玻璃化溶液 生根培养基 蔗糖培养基 蔗糖培养液 暗室培养 低温保存 室温条件 有效途径 蔗糖 丛生芽 铝箔条 香蕉苗 叶原基 预培养 装载液 剥取 快繁 小滴 种源 增殖 种质 接种 装载 生长 安全 | ||
【主权项】：
1.一种香蕉离体茎尖超低温保存方法，其特征在于，所述的香蕉离体茎尖超低温保存方法包括：步骤一：将3.0～6.0cm高的香蕉苗，在含0.4mol/L蔗糖培养基中预培养2d；步骤二：在室温条件下，剥取带1～2个叶原基的茎尖；步骤三：将茎尖经装载液装载30～60min后，利用玻璃化溶液PVS2于0℃下处理50min；步骤四：将茎尖转入至滴有PVS2液滴的0.5cm宽,2cm长的铝箔条上，然后在液氮中蘸一下后，迅速装入盛满液氮的冷冻管中，然后浸入液氮保存；步骤五：在液氮中保存至少1h后，在1.2mol/L蔗糖培养液中化冻；步骤六：利用1.2mol/L蔗糖培养液洗涤2次，每次10min；步骤七：将经过处理的茎尖，转入到含0.3mol/L蔗糖的MS培养基，暗室培养2d，转移到含0.5mg/L 6‑BA的MS培养基中，恢复培养30～35d，将恢复正常生长的种源接种到新的恢复生长培养基中进行增殖快繁，获得丛生芽；步骤八：将丛生芽切成单芽，生根培养基中培养，获得试管苗，备用。
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