[发明专利]一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的培养方法在审
| 申请号： | 201811040147.8 | 申请日： | 2018-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN109097324A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 马亚东;黄宗堂;曹娜 | 申请（专利权）人： | 丰泽康生物医药（深圳）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518001 广东省深圳市罗湖区东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及细胞的诱导分化方法，特别涉及一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的培养方法，将单核细胞培养在培养液中，待细胞达80％‑90％融合后，消化处理，沉淀物再加入培养液传代培养；再依次第一诱导培养液、第二诱导培养液诱导培养，换成培养液培养。本发明可以提高单核细胞向多潜能胚胎干细胞株分化，该成熟的细胞表现为多种标志蛋白的表达，使单核细胞能很好地运用到后续的实验中，为临床上更合理的将单核细胞用于治疗提供了实验数据和理论依据。 | ||
| 搜索关键词： | 单核细胞 培养液 多潜能细胞 诱导培养液 细胞 单核细胞培养 胚胎干细胞 培养液培养 标志蛋白 传代培养 实验数据 消化处理 诱导分化 诱导培养 转化 潜能 分化 融合 治疗 成熟 表现 | ||
【主权项】：
1.一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将单核细胞培养在培养液中，放入培养箱中，待细胞达80％‑90％融合后，洗弃未贴壁的细胞；加入质量浓度0.25％胰蛋白酶进行消化处理直到细胞收缩呈圆形，加入培养液终止消化反应，采用离心分离3‑5分钟，然后沉淀弃去上清液，沉淀物再加入培养液，吸管轻轻吹打细胞制成悬液；按1∶4比例传代培养到培养板上，置于培养箱中培养，每2‑4天更换一次培养液；(2)待步骤(1)中的培养板上的细胞长满后置于第一诱导培养液中进行诱导培养，两天将第一诱导培养液更换成第二诱导培养液，在诱导培养两天，然后将第二诱导培养液更换成培养液，诱导好的细胞在培养中继续培养，每2‑4天更换一次培养液。
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