[发明专利]一种采用微瀑布式梯形密闭培养装置培养醋酸菌的方法

摘要

本发明公开了一种采用微瀑布式梯形密闭培养装置培养醋酸菌的方法，以巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurium为菌株，以每100mL蒸馏水中加入6～8g葡萄糖、1～3mL无水乙醇、3～5g酵母提取物、1～3g牛肉膏、0.2～0.3g柠檬酸钠与柠檬酸质量比为1:1的混合物、5～7.5g氯化钠、2.5～5g乙酸钠、0.75～1.25g吐温‑20、pH值为6～7的溶液为快培液态培养基，采用微瀑布式梯形密闭培养装置高密度培养醋酸菌，可培养得到大量菌体。本发明所用设备成本低、机械化程度高、人力投入少、培养效果好，可实现全封闭连续化自动化培养，在培养结束后一次性导出菌悬液既可得到成品。本装置形成的液体循环回路，提高了原料的利用率与菌浓度，最大限度的提高了设备利用率。

主权项

1.一种采用微瀑布式梯形密闭培养装置快速培养醋酸菌的方法，其特征在于它由下述步骤组成：(1)醋酸菌菌株的培养将巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurium活化培养后的菌株接种于驯化培养基中30±1℃驯化培养48小时，其中驯化培养基是向每100mL蒸馏水中加入2～6g葡萄糖、0.5～2g酵母膏、0.5～2g蛋白胨、0.3～0.4g Na2HPO4·2H2O、0.1～0.2g柠檬酸钠、1～2g琼脂制成，灭菌后加入1～3mL无水乙醇和0～3mL冰乙酸；再按上述方法重复驯化培养0～4次，并且驯化培养基中每100mL蒸馏水加入的冰乙酸逐次等量增加0～1mL；驯化培养完后分离出优势醋酸菌进行一级扩大培养和二级扩大培养，得到种子培养液；(2)装置消毒在密闭条件下，将微瀑布式梯形密闭培养装置用质量分数为95％的冰醋酸水溶液熏蒸24小时，同时使用55W紫外灭菌灯辐照2小时，每立方米密闭空间里质量分数为95％的冰醋酸水溶液的使用量为100～200mL；上述的微瀑布式梯形密闭培养装置是：培养槽(3)的顶部设置有注液口(b)，培养槽(3)内自上而下依次设置有至少4个上表面开口的矩形槽(4)，每个矩形槽(4)内设置有阶梯形导流板(5)，相邻矩形槽(4)内的阶梯形导流板(5)交错设置，阶梯形导流板(5)的末端设置有导流孔(a)，培养槽(3)的底部设置有出液口，出液口通过管道与加热槽(2)的入口相联通，加热槽(2)的出口通过管道经恒流泵(1)与培养槽(3)顶部的注液口相联通；(3)醋酸菌循环培养在无菌条件下，将快培液态培养基接种步骤(1)中的种子培养液，所得培养液从注液口(b)流入培养槽(3)中，从最上层的阶梯形导流板(5)逐层流入最下层的阶梯形导流板(5)，再经培养槽(3)底部的出液口流入加热槽(2)，加热后的培养液经蠕动泵(1)循环流入培养槽(3)中培养，培养液循环流速为500～800mL/min，培养温度为25～35℃；培养5～9天后，关闭恒流泵(1)、加热槽(2)，回收培养槽(3)内的菌悬液，经离心后收集菌体，即得醋酸菌；上述的快培液态培养基是向每100mL蒸馏水中加入6～8g葡萄糖、1～3mL无水乙醇、3～5g酵母提取物、1～3g牛肉膏、0.2～0.3g柠檬酸钠与柠檬酸质量比为1:1的混合物、5～7.5g氯化钠、2.5～5g乙酸钠、0.75～1.25g吐温‑20，pH值为6～7。