[发明专利]一种红掌新种质耐寒性的鉴定方法

摘要

本发明公开了一种红掌新种质耐寒性的鉴定方法,该方法通过测定红掌新种质与3个不同耐寒性品种整株在受到冷害时的叶片冷害指数、叶柄冷害指数2个形态指标，以及叶片相对电导率变化率、叶绿素荧光参数Fv/Fm变化率2个生理指标，并结合主成份和聚类分析方法来进行红掌新种质的鉴定，此方法所采用指标反映了红掌整株的冷害形态变化，以及膜系统和光合系统受到的伤害，避免了单一化合物指标的不稳定性，其调查全面，结论科学，鉴定结果有利于指导红掌耐寒性新品种的选育。

主权项

1.一种红掌新种质耐寒性的鉴定方法，其特征在于包括以下步骤:步骤1、制备材料：准备苗龄一致且均未进入开花期的待测红掌新种质以及三个不同耐寒性红掌品种各12株，所述三个不同耐寒性红掌的品种分别为‘阿拉巴马’、‘轰动’、‘粉冠军’，对四个品种共计48株红掌进行预处理,待恢复生长1个月后，转至步骤2；步骤2、低温胁迫：选取步骤1中恢复生长1个月后的四种红掌，每种红掌随机选取6株放入人工气候培养箱中，待3天低温胁迫处理后，将四种红掌转入25℃光照培养箱进行恢复生长7天；转至步骤3和步骤4；步骤3、形态指标测定：所述形态指标测定包括叶片冷害指数(LCI)调查和叶柄冷害指数(PCI)调查；选取同一品种的6个植株的叶片冷害指数的平均值为该品种的叶片冷害指数；选取同一品种的6个植株的叶柄冷害指数的平均值为该品种的叶柄冷害指数；步骤4、生理指标测定：所述生理指标测定包括相对电导率变化率(αREC)测定和叶绿素荧光参数Fv/Fm变化率(αFv/Fm)测定，所选测定叶片为红掌植株从上至下第一片成熟叶；所述相对电导率(REC)测定的方法采用电导法，选取每个品种的6个植株从上至下的第一片成熟叶,测定共计6个叶片的混合样品，并且3次重复测定，计算平均值，之后通过以下公式计算REC变化率(αREC)αREC＝(处理后测定值－处理前测定值)/处理前测定值上述公式中的处理后测定值为低温胁迫后的6个叶片混合样品3次重复测定的相对电导率(REC)的平均值，处理前测定值为低温胁迫前的6个叶片混合样品3次重复测定的相对电导率(REC)的平均值；所述叶绿素荧光参数Fv/Fm测定的方法为采用Handy PEA植物效率仪(Hansatech公司),测定四种红掌样品的6个植株从上至下的第一片成熟叶，并计算6个叶片的叶绿素荧光参数Fv/Fm平均值，之后通过以下公式计算Fv/Fm变化率(αFv/Fm)αFv/Fm＝(处理后测定值－处理前测定值)/处理前测定值上述公式中的处理后测定值为低温胁迫后的6个叶片的叶绿素荧光参数Fv/Fm的平均值，处理前测定值为低温胁迫前的6个叶片的叶绿素荧光参数Fv/Fm的平均值；步骤5、品种耐寒性综合得分计算：将LCI、PCI、αREC乘以“‑1”，而αFv/Fm数值不变，之后将数据输入SPSS软件，并通过分析→降维→因子分析模块对数据进行主成份分析，其输出结果包括各主成分特征值(λj)、贡献率(Cj)、累积贡献率以及各指标因子载荷矩阵(aij)；根据累积贡献率≥85％确定主成份m个，根据因子载荷矩阵(aij)与特征值(λj)计算各主成份中各指标负荷量(Tij)，再依据负荷量(Tij)与贡献率(Cj)计算各指标综合得分系数(Ai)，以确定各品种主成份综合得分(Y)，具体公式如下：式中，aij为第i个指标在第j个主成份上的初始因子载荷，λj为第j个主成份的特征值，Tij表示第i个指标在第j个主成分上的负荷量，Cj表示第j个主成份的贡献率，ZXi为第i个指标正向化兼标准化后的数值，m为主成份个数，n为指标个数；步骤6、聚类分析进行新种质耐寒性鉴定：以耐寒性综合得分Y为变量，并将此变量输入SPSS软件，并通过分析→分类→层次聚类模块进行层次聚类分析，其中聚类方法选择最长距离法，结果输出形式选择树状图；如果树状图中新种质与‘阿拉巴马’聚为一类，则鉴定为高耐寒种质；如果新种质与‘轰动’聚为一类则鉴定为中耐寒种质；如果新种质与‘粉冠军’聚为一类则鉴定为低耐寒种质。