[发明专利]苜蓿花叶病毒real-time RT-PCR检测试剂盒及其检测方法

摘要

一种苜蓿花叶病毒real‑time RT‑PCR检测试剂盒，包括以下组分：RT‑PCR buffer，2×RT‑PCR buffer，40‑250μL；Ex Taq HS 5U/μL，1.5‑20μL；Prime Script RT Enzyme Mix，1.5‑20μL；苜蓿花叶病毒AMV上游引物，浓度为10μmol/L，1.5‑30μL；苜蓿花叶病毒AMV下游引物，浓度为10μmol/L，1.5‑30μL；苜蓿花叶病毒AMV探针10μmol/L，1.5‑30μL；无RNA酶的去离子水，20μL‑1mL；苜蓿花叶病毒AMV无侵染活性的阳性对照6‑60μL。利用本发明检测方法能特异扩增出苜蓿花叶病毒的基因片段，检测的稳定性好，特异性强，一致性高，检测周期短。

主权项

1.一种苜蓿花叶病毒real‑time RT‑PCR检测试剂盒，病原为苜蓿花叶病毒，其特征在于包括以下组分：RT‑PCR buffer，2×RT‑PCR buffer，40‑250μL；Ex Taq HS，1.5‑20μL；Prime Script RT Enzyme Mix，1.5‑20μL；苜蓿花叶病毒AMV上游引物，浓度为10μmol/L，1.5‑30μL；苜蓿花叶病毒AMV下游引物，浓度为10μmol/L，1.5‑30μL；苜蓿花叶病毒AMV探针10μmol/L，1.5‑30μL；无RNA酶的去离子水，20μL‑1mL；苜蓿花叶病毒AMV无侵染活性的阳性对照6‑60μL；RT‑PCR扩增引物和探针为：苜蓿花叶病毒AMV上游引物为：5′‑GCTACAGGAGAGTTAGTG‑3′；苜蓿花叶病毒AMV下游引物为：5′‑GACAGCAGAGTTCATATTG‑3′；苜蓿花叶病毒AMV探针序列为：5′‑TGTTGACACCGACCATGATGCTA‑3′。