[发明专利]一种用于美容保养的脐带间充质干细胞液的制备方法

摘要

本发明涉及一种用于美容保养的脐带间充质干细胞液的制备方法，属于医学美容技术领域，包括以下步骤：步骤一，获取脐带干细胞；步骤二，传代培养；步骤三，脐带干细胞液的制备。该技术方案中脐带干细胞能够分泌多种细胞生长因子，为皮肤表皮细胞提供良好的微环境，例如纤维母细胞生长因子、成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子、胰岛素生长因子、血管生长素等，能激活人角质细胞在体外的增殖和迁移，进入促进皮肤再生和皮肤创面愈合，并且可以促进皮肤表皮细胞成熟，增加皮肤弹性，滋润肌肤，消除皱纹和预防色斑，具有很好的美容功效。

主权项

1.一种用于美容保养的脐带间充质干细胞液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，获取脐带干细胞，获取脐带真皮组织和脐带血，在常温下用生理盐水清洗2次～5次，将脐带真皮组织剪成小块，向其中加入磷酸缓冲盐溶液混合，室温下离心去除下层液体，加入脐带血，用磷酸缓冲盐溶液冲洗后再次离心，去除上清液，加入胶原酶，放置于37℃恒温震荡箱中20min～60min，再次离心去除上清液，然后加入含有胎牛血清的DMEM培养液，用细胞筛过滤后离心去除上清液，再次加入含有胎牛血清的DMEM培养液中，在37℃温度条件下，5％CO2恒温培养；步骤二，传代培养，将步骤一的脐带干细胞每隔2天更换胎牛血清的DMEM培养液，待细胞生长至90％融合后用胰蛋白酶消化后传代，在脐带干细胞生长三代以后，从胎牛血清的DMEM培养液重取出；步骤三，脐带干细胞液的制备，将步骤二取出的脐带干细胞用磷酸缓冲盐溶液清洗，加入胰蛋白酶消化1min～3min，按照脐带干细胞、磷酸缓冲盐溶液、DMEM培养液三者的体积百分比1:2～5:4～10进行混合，加入甘油和细胞生长因子制得脐带干细胞液。