[发明专利]用于凋亡细胞识别和标记的融合蛋白及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201810743895.6 | 申请日： | 2018-07-06 |
| 公开（公告）号： | CN110684115A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 华子春;高梦月 | 申请（专利权）人： | 南京吉瑞康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/65;C12N15/70 |
| 代理公司： | 32242 江苏银创律师事务所 | 代理人： | 何震花 |
| 地址： | 210019 江苏省南*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物化学和检验与检测领域，具体涉及黄色荧光蛋白标记的Annexin A5及其制备方法和在制备凋亡检测试剂中的应用。本发明以pET28a‑Annexin A5‑EGFP‑his重组质粒为模板，构建了重组质粒pET28a‑Annexin A5‑Citrine‑his、pET28a‑Annexin A5‑Venus‑his、pET28a‑Annexin A5‑Ypet‑his。大量表达Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白，通过Ni柱亲和层析纯化获得了这三种蛋白，纯度约为90％。流式细胞仪检测结果显示：Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白均可以识别和标记凋亡细胞，它们与凋亡细胞的亲和力分别是3113nmol/L，444.3nmol/L和391.6nmol/L。以上结果显示Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白均可以用于凋亡细胞的识别和标记。 | ||
| 搜索关键词： | 凋亡细胞 融合蛋白 重组质粒 制备 黄色荧光蛋白 流式细胞仪 柱亲和层析 生物化学 检测结果 检测领域 检测试剂 凋亡 构建 亲和力 蛋白 检验 应用 | ||
【主权项】：
1.用于凋亡细胞识别和标记的融合蛋白Annexin A5-Citrine，其DNA序列如SEQ IDN0:1所示，其蛋白序列如SEQ ID N0:4所示。/n
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