[发明专利]可提高卵巢颗粒细胞活性的蒲公英提取物的制备及其应用

摘要

可提高卵巢颗粒细胞活性的蒲公英提取物的制备及其应用，以干燥蒲公英为原料，通过提取、浓缩、酸化、上柱、纯化等得到蒲公英提取物。本发明制备的蒲公英提取物经实验表明：能使卵巢中颗粒细胞数量增殖；能使卵巢中颗粒细胞中FSHR、LHR、IGFR、CPY19A1mRNA表达的受体量显著增加、并促进卵巢中E2、P激素分泌增强；减少临床用药量及减少对促卵药的耐药性有显著效果。以上三方面，实验表明蒲公英提取物提高卵巢颗粒细胞活性中，其差异显著具有统计学意义（P＜0.05）。

主权项

1.一种可提高卵巢颗粒细胞活性的蒲公英提取物的制备工艺及其应用，其特征是以干燥蒲公英为原料，通过提取、浓缩、酸化、上柱、纯化得到蒲公英提取物，具体工艺步骤如下：（1）蒲公英提取：将干燥蒲公英浸泡至溶剂纯净水中进行水煎，纯净水的质量为蒲公英全草的15～20倍，水煎提取的温度控制在90～100℃，水煎次数为2次，每次3小时，然后将两次得到的提取液合并，然后将提取液通过120目滤网过滤，得滤液；（2）浓缩：将滤液进行减压浓缩，除去溶剂，浓缩可溶性固形物为40%～45%，从而得到蒲公英浓缩液；（3）酸化：将2%质量浓度的盐酸加入至蒲公英浓缩液中，调PH至3～4，然后静置24小时后进行离心，得到蒲公英上清液；（4）上层析柱洗脱：将蒲公英上清液进行柱层析，采用DE‑52纤维素，20mmol/ltris溶胀，用PH计调PH为8，使用20mmol/ltris洗脱柱子直到流出来的液体不再变色为止，再用3mol/l氯化钠洗脱柱子，用纯净水洗脱至电导率为≤10us/cm，最后再用0.2mol/l氢氧化钠洗脱，氢氧化钠洗脱得到的液体进行浓缩；（5）纯化：步骤（4）得到浓缩液浓缩成原来体积的1/2后，取样上柱采用葡聚糖凝胶柱Sephadex G‑25 medium，用0.2mol/l的三羟甲基氨基甲烷水溶液洗脱，得到的洗脱液，进行浓缩到原来体积的1/5，再将其浓缩液上柱采用葡聚糖凝胶柱Sephadex G‑25 superfine，分别用超纯水洗脱得到的馏分进行低温离心浓缩干燥，得到的蒲公英提取物。