[发明专利]一种sRNA干扰体系在甲基菌中的构建方法在审
| 申请号： | 201810670151.6 | 申请日： | 2018-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN108753675A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 朱丽萍;杨松 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/65;C12N15/74;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种sRNA干扰体系在甲基菌中的构建方法，首先利用转座酶将p15A质粒插入M.extorquens AM1和PA1中；sRNA干扰体系元件的扩增及载体构建；再进行目的基因的干扰及菌株筛选，最后荧光蛋白标记载体的构建及荧光蛋白基因的表达鉴定。本发明通过抑制竞争旁路代写途径的表达，优化代谢产物流，提高目标产物的表达水平。高效的基因表达技术对于次级代谢产物产量的优化提高有重要意义，可广泛应用于提高某种代谢产物产量研究。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 次级代谢产物 基因表达技术 荧光蛋白标记 荧光蛋白基因 表达水平 代谢产物 菌株筛选 目标产物 目的基因 载体构建 重要意义 产物流 转座酶 扩增 旁路 质粒 代谢 优化 应用 研究 | ||
【主权项】：
1.一种sRNA干扰体系在甲基菌中的构建方法，其特征在于按照以下步骤进行：步骤1,利用转座酶将p15A质粒插入M.extorquens AM1中；步骤2，sRNA干扰体系元件的扩增及载体构建；步骤3，目的基因的干扰及菌株筛选。步骤4，荧光蛋白标记载体的构建及荧光蛋白基因的表达鉴定。
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