[发明专利]核酸层析快速检测转基因产品的方法有效
申请号: | 201810641715.3 | 申请日: | 2018-06-21 |
公开(公告)号: | CN108828230B | 公开(公告)日: | 2021-04-30 |
发明(设计)人: | 任雯;刘亚;赵久然;李雨峰;陈立柱;杨海侠 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院;宝瑞源生物技术(北京)有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/558;G01N21/78;C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京京万通知识产权代理有限公司 11440 | 代理人: | 齐晓静 |
地址: | 100097 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种核酸层析快速检测转基因产品的方法。本发明包括转基因产品处理、核酸裂解、核酸PCR扩增和采用待测PCR扩增样品核酸层析试纸条检测的四个步骤。本发明所述的方法具有灵敏度高、检测时间短、安全性高等优点,可广泛应用于转基因产品精确快速检测,提高食品的监管力度和质量水平,监管转基因食品非法销售提供有效的方法。 | ||
搜索关键词: | 核酸 层析 快速 检测 转基因 产品 方法 | ||
【主权项】:
1.一种核酸层析快速检测转基因产品的方法,其包括以下步骤:步骤1)样本处理:取30mg待测粉状物样本,加500μl ddH2O,使用移液枪多次吹吸混匀,静置5min得到待测样本备用;步骤2)DNA一管法提取步骤:取5μl核酸释放剂,加入PCR反应管中;取所述待测样本5μl加入对应的PCR反应管中,并用移液器在管底吹打混匀10次;每个PCR反应管中加30μl无菌石蜡油;将PCR反应管放置在PCR仪中进行裂解,得到裂解样品;步骤3)试样PCR反应:在PCR反应管中依次加入反应试剂、混匀,加入到所述裂解样品中;将PCR反应管放到离心机上,500g‑1000g离心10s,然后取出PCR反应管,放入PCR仪中进行扩增得到反应产物;步骤4)PCR产物胶体金检测:将PCR反应管从PCR仪中取出,取预定量的反应产物到入胶体金核酸层析试纸条上,等待5‑10min后观察显色状况;如果胶体金检测T线和C线出现肉眼可见显色,则表明样品含有转基因成分。
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