[发明专利]一种在MDCK全悬浮细胞上增殖禽流感病毒的方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201810551857.0 申请日: 2018-05-31
公开(公告)号: CN108753737B 公开(公告)日: 2020-12-11
发明(设计)人: 陈宏;王博;赵博;崔凯;黄琳;沈玥;李莉;杜鑫;张丽娜;金燕斌;朱长动 申请(专利权)人: 吉林冠界生物技术有限公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;C12N5/071;C12N5/02
代理公司: 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人: 李永宏
地址: 134000 吉*** 国省代码: 吉林;22
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摘要: 发明涉及一种在MDCK全悬浮细胞上增殖禽流感病毒的方法及其应用。所述方法包括:将MDCK细胞全悬浮培养至7.0×106~1.0×107cells/mL时,按MOI=0.001~0.0001接种鸡胚禽流感病毒;接毒后在pH值6.9~7.3、溶氧30~60%、温度32~37℃的环境下培养,当病毒达到足够高的滴度后分离并提纯病毒粒子。本方法由于种毒无需循环,因而缩短了生产周期,且种毒变异风险大大降低。通过本发明提供的方法培养重组禽流感病毒的HA能够达到1:1024,每1ml病毒含量≥108.0TCID50,每0.1ml病毒含量≥108.0TCID50,而种毒的接入量量减少10倍以上。
搜索关键词: 一种 mdck 悬浮 细胞 增殖 禽流感 病毒 方法 及其 应用
【主权项】:
1.一种在MDCK全悬浮细胞上增殖禽流感病毒的方法,其特征在于,包括:将MDCK细胞全悬浮培养至7.0×106~1.0×107cells/mL时,按MOI=0.001~0.0001接种鸡胚禽流感病毒;接毒后在pH值6.9~7.3、溶氧30~60%、温度32~37℃的环境下培养,当病毒达到足够高的滴度后分离并提纯病毒粒子。
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