[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒ORF1基因全序列的扩增方法有效
申请号: | 201810532731.9 | 申请日: | 2018-05-29 |
公开(公告)号: | CN108754019B | 公开(公告)日: | 2022-04-08 |
发明(设计)人: | 郭霄峰;莫梅君;邝燕齐 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林丽明 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒ORF1基因全序列的扩增方法,扩增方法中涉及8对引物,各引物对上下游引物依次如SEQ ID NO.1~16。具体扩增步骤为提取PEDV总RNA,反转成cDNA,用所述8对引物进行扩增反应,将PCR产物连接到克隆载体pTA2 Vector中,转化TOP10感受态细胞,选取阳性克隆,测序鉴定,最后拼接序列,得到ORF1基因组全序列。可以通过该方法扩增获取病料中猪流行性腹泻病毒变异株的ORF1基因,并可以捕获猪流行性腹泻病毒变异株在细胞培养传代过程中基因序列的变化。也可以作为一种检测病料中PEDV的方法,并为PEDV的ORF1基因相关研究奠定基础。 | ||
搜索关键词: | 种猪 流行性 腹泻 病毒 orf1 基因 序列 扩增 方法 | ||
【主权项】:
1.一种猪流行性腹泻病毒ORF1基因全序列的扩增引物组,其特征在于,由8个引物对组成,各引物对上下游引物依次如SEQ ID NO.1~16所示。
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