[发明专利]一种基于固态纳米孔检测过氧化氢的方法有效
| 申请号： | 201810506897.3 | 申请日： | 2018-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN108645905B | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 谭生伟;刘全俊 | 申请（专利权）人： | 南通大学 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327 |
| 代理公司： | 11340 北京天奇智新知识产权代理有限公司 | 代理人： | 任毅<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 226000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于固态纳米孔检测过氧化氢的方法，通过在10‑100nm超薄氮化硅膜上打不同的纳米孔，用多种硅烷化处理，实现纳米孔表面和内壁差异化修饰改性，通过硅烷偶联分子将过氧化物酶偶联在纳米孔内壁，构建出可控制的，稳定的，高灵敏度的纳米孔内单分子辣根过氧化物酶传感器件，通过解析酶促反应的纳米孔离子电流信号，纳米孔内单个酶分子酶促反应Km与Kcat的模型机制及规律，以实时定量检测过氧化氢。本发明通过纳米孔内外差异化修饰，及辣根过氧化物酶单分子在纳米孔内的可控修饰，建立的特异性的小分子实时传感检测方法，其精度达到纳摩尔以下。 | ||
| 搜索关键词： | 纳米孔 辣根过氧化物酶 过氧化氢的 固态纳米 酶促反应 单分子 内壁 修饰 离子电流信号 实时定量检测 单个酶分子 硅烷化处理 过氧化物酶 传感检测 传感器件 氮化硅膜 高灵敏度 过氧化氢 模型机制 偶联分子 修饰改性 差异化 可控制 小分子 检测 构建 硅烷 可控 外差 解析 | ||
【主权项】：
1.一种基于固态纳米孔检测过氧化氢的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：/n步骤A.纳米孔的制备：在10-100 nm的超薄氮化硅膜上打纳米孔；/n步骤B.纳米孔的修饰及单分子酶传感器构建：用多种硅烷化处理，实现纳米孔表面和内壁差异化修饰改性，多种硅烷化处理为甲基硅烷、三氟或氨基硅烷、羧基硅烷中的多种；通过硅烷偶联分子将单个辣根过氧化物酶稳定的组装固定在纳米孔孔内壁得到纳米孔传感器；/n步骤C.底物特异性传感检测：将不同浓度过氧化氢加入反应体系，分析电流特征信号，画出过氧化氢浓度标准曲线，利用该标准曲线实时定量检测过氧化氢；所述步骤A中，采用FEI Strata 201 FIB系统，以30 kV的加速电势轰击10-100 nm的超薄氮化硅膜表面打纳米孔。/n
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