[发明专利]一种用于人类Rh血型23个基因位点的基因分型检测试剂盒

摘要

本发明属于人核酸体外检测技术领域，具体涉及人类5号、19号、21号及X/Y染色体23个基因位点的基因分型检测试剂盒。本发明首先设计了对分布于人类5号、19号、21号及X/Y染色体上的23个基因位点同时进行基因分型的复合PCR扩增系统，其中PCR扩增引物组为：SEQ ID No.1～SEQ ID No.53；本发明的基因分型检测试剂盒包括引物组合物容器、PCR反应母液容器；引物组合物容器包含引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.53组合物贮存液。本发明实现了对23个基因位点的单管扩增，各荧光通道内以及不同荧光通道内的基因位点扩增均衡，分型图谱良好；而且可显著节省成本、人力和时间，提高工作效率。

主权项

1.一种对人类5号、19号、21号及X/Y染色体23个基因位点同时进行基因分型的复合PCR扩增系统，所述23个基因位点分为两组，第一组为12个基因位点：Box、IN07、pEx01、IN02、IN08、Ref19、SID1、SID2、Ex03、IN01、IN03、SID3；第二组为11个基因位点：AMEL、1227Ga、wD2_Gc、wD15_aG、wD1_gT、Dc、wD3_Cg、wD4_Cg、Ex10、Ee、SID4；所述复合PCR扩增系统包括第一组和第二组所述的PCR扩增引物，其中第一组包括下组位点对应的PCR扩增引物：位点Box，相应引物序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示；位点IN07，相应引物序列如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4所示；位点pEx01，相应引物序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6所示；位点IN02，相应引物序列如SEQ ID No.7、SEQ ID No.8所示；位点IN08，相应引物序列如SEQ ID No.9、SEQ ID No.10所示；位点Ref19，相应引物序列如SEQ ID No.11、SEQ ID No.12所示；位点SID1，相应引物序列如SEQ ID No.13、SEQ ID No.14所示；位点SID2，相应引物序列如SEQ ID No.15、SEQ ID No.16所示；位点Ex03，相应引物序列如SEQ ID No.17、SEQ ID No.18所示；位点IN01，相应引物序列如SEQ ID No.19、SEQ ID No.20所示；位点IN03，相应引物序列如SEQ ID No.21、SEQ ID No.22所示；位点SID3，相应引物序列如SEQ ID No.23、SEQ ID No.24所示；其中基因位点Box、pEx01、IN02、IN08、Ref19、SID1、SID2、SID3对应的上游引物均采用FAM荧光素进行标记；基因位点IN07、Ex03、IN01、IN03对应的下游引物均采用FAM荧光素进行标记；第二组包括下组位点对应的PCR扩增引物：位点AMEL，相应引物序列如SEQ ID No.25、SEQ ID No.26所示；位点1227Ga，相应引物序列如SEQ ID No.27、SEQ ID No.28、SEQ ID No.29所示；位点wD2_Gc，相应引物序列如SEQ ID No.30、SEQ ID No.31、SEQ ID No.32所示；位点wD15_aG，相应引物序列如SEQ ID No.33、SEQ ID No.34、ID No.35所示；位点wD1_gT，相应引物序列如SEQ ID No.36、SEQ ID No.37、SEQ ID No.38所示；位点Dc，相应引物序列如SEQ ID No.39、SEQ ID No.40所示；位点wD3_Cg，相应引物序列如SEQ ID No.41、SEQ ID No.42、SEQ ID No.43所示；位点wD4_Cg，相应引物序列如SEQ ID No.44、SEQ ID No.45、SEQ ID No.46所示；位点Ex10，相应引物序列如SEQ ID No.47、SEQ ID No.48所示；位点Ee，相应引物序列如SEQ ID No.49、SEQ ID No.50、SEQ ID No.51所示；位点SID4，相应引物序列如SEQ ID No.52、SEQ ID No.53所示；其中基因位点AMEL、1227Ga、wD2_Gc、wD1_gT、wD3_Cg、Ex10、SID4对应的下游引物采用TAMRA标记；基因位点wD15_aG、Dc、wD4_Cg、Ee对应的上游引物采用TAMRA标记。