[发明专利]一种基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法

摘要

本发明涉及一种基于分子印迹‑拉曼光谱的抗生素检测方法，属于食品检测技术领域。以抗生素为模板分子，提出了一种由抗生素分子印迹的PNIPAM温敏凝胶膜与纳米金组成的复合纳米材料（MIP‑PNM‑Au），利用该复合材料的拉曼增强效应，实现对抗生素的富集及超灵敏拉曼光谱检测。该方法将分子印迹技术（MIP）的特异性识别功能、凝胶的智能响应特性以及纳米金SERS性质相结合。MIP‑PNM‑Au复合材料通过分子印迹技术提高复合材料的选择性富集作用，借助于凝胶的温敏性质调节纳米颗粒的密度、间距等参数，从而调谐表面等离子体共振和电磁场强度，实现“热点”的动态产生，使拉曼增强效果最优化。

主权项

1.一种基于分子印迹‑拉曼光谱的抗生素检测方法，其特征在于，包括如下步骤：第1步，纳米金溶胶的制备：向120～180mL的去离子水中加入4～6mL1%HAuCl4，搅拌，再加入1～3mLK2CO3溶液，最后快速加入5～10mLNaBH4溶液，搅拌3～6min，将得到的酒红色的纳米金溶胶（AuNPs）溶液；第2步，PNM‑Au复合水凝胶：在带有冷凝回流和磁力搅拌装置的烧瓶中加入1～3gN‑异丙基丙烯酰胺、0.2～0.4g四环素、15～25mg十六烷基磺酸钠、15～25mg交联剂N,N‑甲叉双丙烯酰胺、120～160mL去离子水和20～30mL纳米金溶胶溶液组成的溶液，超声场下分散均匀，在氮气流保护下升温至65～75℃，迅速加入配好的8～12mL过硫酸铵溶液，将溶液倒入模具中反应，反应结束后生成膜状凝胶，切胶之后，采用电场透析纯化，除去表面活性剂、未反应的单体等物质，得到PNM‑Au复合水凝胶；第3步，拉曼光谱基底的制备：取PNM‑Au复合水凝胶，然后依次用去pH6.0～6.5的稀HCl溶液和去离子水洗脱，烘干后，得到拉曼光谱基底；第4步，标准曲线的绘制：配制不同浓度的四环素水溶液，分别将拉曼光谱基底分散于四环素标准溶液中进行吸附，滤出后，铺展于载玻片上，采用表面增强拉曼光谱的固体激光头进行检测，绘制响应值与浓度之间的曲线关系，得到标准曲线；第5步，样本检测：将拉曼光谱基底分散于待测样本中进行吸附，采用表面增强拉曼光谱的固体激光头进行检测，根据标准曲线计算出待测样本中的四环素含量。