[发明专利]一种基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法

权利要求书

1.一种基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

第1步，纳米金溶胶的制备：向120～180mL的去离子水中加入4～6mL1%HAuCl₄，搅拌，再加入1～3mLK₂CO₃溶液，最后快速加入5～10mLNaBH₄溶液，搅拌3～6min，将得到的酒红色的纳米金溶胶（AuNPs）溶液；

第2步，PNM-Au复合水凝胶：在带有冷凝回流和磁力搅拌装置的烧瓶中加入1～3gN-异丙基丙烯酰胺、0.2～0.4g四环素、15～25mg十六烷基磺酸钠、15～25mg交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺、120～160mL去离子水和20～30mL纳米金溶胶溶液组成的溶液，超声场下分散均匀，在氮气流保护下升温至65～75℃，迅速加入配好的8～12mL过硫酸铵溶液，将溶液倒入模具中反应，反应结束后生成膜状凝胶，切胶之后，采用电场透析纯化，除去表面活性剂、未反应的单体，得到PNM-Au复合水凝胶；

第3步，拉曼光谱基底的制备：取PNM-Au复合水凝胶，然后依次用pH6.0～6.5的稀HCl溶液和去离子水洗脱，烘干后，得到拉曼光谱基底；

第4步，标准曲线的绘制：配制不同浓度的四环素水溶液，分别将拉曼光谱基底分散于四环素标准溶液中进行吸附，滤出后，铺展于载玻片上，采用表面增强拉曼光谱的固体激光头进行检测，绘制响应值与浓度之间的曲线关系，得到标准曲线；

第5步，样本检测：将拉曼光谱基底分散于待测样本中进行吸附，采用表面增强拉曼光谱的固体激光头进行检测，根据标准曲线计算出待测样本中的四环素含量。

2.根据权利要求1所述的基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法，其特征在于，所述的第1步中，去离子水的温度是0～4℃；K₂CO₃溶液浓度是0.2mol·L^-1；NaBH₄溶液浓度是0.5mg·mL^-1。

3.根据权利要求1所述的基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法，其特征在于，所述的第2步中，反应过程是65～75℃条件下反应4h；过硫酸铵溶液浓度是0.0184mol·L^-1；反应过程中还加入甲氧基聚乙二醇甲基丙烯酸酯单体0.2～0.4g。

4.根据权利要求1所述的基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法，其特征在于，所述的第3步中，洗脱条件是在超声作用下洗脱0.5～1h。

5.根据权利要求1所述的基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法，其特征在于，所述的第4步中，四环素水溶液的浓度范围是；0.5ng/mL～10000ng/mL；吸附的温度是32～35℃。

6.根据权利要求1所述的基于分子印迹-拉曼光谱的抗生素检测方法，其特征在于，所述的待测样本是牛奶、废水、地表水或者食品提取液。