[发明专利]一种DNA甲基转移酶活性的检测方法在审

专利信息
申请号: 201810371607.9 申请日: 2018-04-24
公开(公告)号: CN108627507A 公开(公告)日: 2018-10-09
发明(设计)人: 李志美;皮婷;迟宝珠;张晓 申请(专利权)人: 南昌大学
主分类号: G01N21/78 分类号: G01N21/78;G01N21/33
代理公司: 南昌青远专利代理事务所(普通合伙) 36123 代理人: 刘爱芳
地址: 330000 江西省南昌市*** 国省代码: 江西;36
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摘要: 发明公开了一种DNA甲基转移酶活性的检测方法,包括如下步骤:1)以CpG甲基转移酶(M.SssI)为催化剂对HP1进行甲基化催化反应;2)失活M.SssI;3)在步骤2所得溶液中加入核酸内切酶HpaII;4)制备Au NPs‑HP2;5)将Au NPs‑HP2和切口酶Nt.AlwI加入步骤3所得溶液中;6)将氧化石墨烯加入步骤5所得溶液中,得到GO‑Au NPs样品溶液;7)采用紫外可见分光光度法分析GO‑Au NPs样品溶液,由此测定M.SssI的活性。本发明还提供了DNA甲基转移酶活性的检测方法的应用。本发明的检测方法易于操作,具有良好的灵敏度和选择性,在药物开发和临床诊断中具有良好的应用前景。
搜索关键词: 检测 样品溶液 紫外可见分光光度法 核酸内切酶 氧化石墨烯 催化反应 临床诊断 药物开发 甲基化 灵敏度 切口酶 失活 制备 催化剂 应用 分析
【主权项】:
1.一种DNA甲基转移酶活性的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:1)以M.SssI为催化剂对HP1进行甲基化催化反应;2)失活M.SssI;3)在步骤2所得溶液中加入核酸内切酶HpaII;4)制备Au NPs‑HP2;5)将Au NPs‑HP2和切口酶Nt.AlwI加入步骤3所得溶液中;6)将氧化石墨烯加入步骤5所得溶液中,得到GO‑Au NPs样品溶液;7)采用紫外可见分光光度法分析GO‑Au NPs样品溶液,由此测定M.SssI的活性。
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