[发明专利]一种结构化照明的光切片荧光显微成像方法和装置有效

专利信息
申请号: 201810367723.3 申请日: 2018-04-23
公开(公告)号: CN108680544B 公开(公告)日: 2021-04-06
发明(设计)人: 匡翠方;黎文柔;王晓娜;张乘风;刘旭;李海峰 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64;G01N21/01;G02B21/06;G02B21/36
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 胡红娟
地址: 310013 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种结构化照明的光切片荧光显微成像方法和系统,属于光学成像技术领域,包括光源、承载荧光样品的样品台和检测荧光样品发出荧光的检测系统;光源和样品台间设有沿光路依次布置的:将光束变为径向偏振光的偏振片和径向偏振转换器;对径向偏振光进行相位调制的相位掩模板;对调制后的光束进行衍射的衍射光栅;以及移动荧光样品上照明图案的振镜;由振镜出射的光束从Y向照射到荧光样品上,检测系统从Z向收集荧光;还包括一处理器,控制振镜从X向移动照明的照明图案和控制样品台在Z向移动,并对检测系统收集的光强分布图像进行处理和重构,生成样品的三维图像。通过该装置和方法形成的光束,在具有较小的主瓣的同时具有较大的视场。
搜索关键词: 一种 结构 照明 切片 荧光 显微 成像 方法 装置
【主权项】:
1.一种结构化照明的光切片荧光显微成像方法,其特征在于,包括以下步骤:1)激光经过扩束准直后,转换为径向偏振光,所述径向偏振光经过相位调制和衍射形成一组沿X向排列的照明图案,并沿Y向投射到荧光样品上激发荧光;2)从Z向收集所述的荧光,得到Z向位置的光强分布图像;3)沿X向移动所述照明图案,在移动过程中,从Z向收集荧光得到多幅光强分布图像,处理后得到Z向的二维图像;4)以固定的步长沿Z向移动所述荧光样品,重复步骤3)得到样品在每个Z向位置处的一组光强分布图像,对多组光强分布图像进行处理得到多个Z向位置处的二维图像;5)对多个Z向位置处的二维图像进行三维重构,实现对样品的三维成像。
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