[发明专利]一种适用于碱水环境下鱼类氨排泄率的测定方法

摘要

本发明公开了一种针对碱水环境下鱼类排氨率的测定方法；包括：将每尾鱼独立淡水稳定后，换同体积碱水胁迫，称量鱼体质量和体长；分别取胁迫前后的水样，每200mL水样中依次加入10μL试剂I、20μL试剂II、10μL试剂III后在25～35℃黑暗孵育；630nm波长下检测吸光值；标准曲线制作过程中采用改进标曲，标曲用水的碱度与实验水体浓度一致，分别将水样的吸光值代入氨氮浓度和吸光值的标准曲线方程，得出胁迫前后的水样中的氨氮浓度；按氨氮排泄率计算公式计算得到碱水环境下鱼类排氨率。本发明解决了常规测定方法在碱水环境下应用误差高的问题，提高测定准确率，为鱼类对碱性环境的适应机制研究提供基础技术。

主权项

1.一种针对碱水环境下鱼类排氨率的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括如下步骤：1)将每尾鱼独立用淡水稳定预设时间t1后，换同体积碱水胁迫预设时间t2；称量鱼体质量和体长；2)分别取步骤1)胁迫前后的水样，每200mL水样中依次加入10μL试剂I、20μL试剂II、10μL试剂III后在25～35℃黑暗孵育；所述试剂I为苯酚的乙醇溶液，试剂III为硝普钠水溶液，试剂II为体积比为2∶1的二氯异氰尿酸钠水溶液和柠檬酸钠/NaOH水溶液的混合溶液；3)630nm波长下检测吸光值；分别将水样的吸光值代入氨氮浓度和吸光值的标准曲线方程，得出步骤1)胁迫前后的水样中的氨氮浓度；4)按如下式所述的氨氮排泄率计算公式计算得到碱水环境下鱼类排氨率；其中，AER为氨氮排泄率，单位为μmol N/kg/h；[Tamm]i和[Tamm]f分别为初始和结束总氨氮浓度，单位为μmol N/L；V为水体体积，单位为L；Δt为排泄初始和结束时间差，单位为h；m为鱼体体重，单位为kg。