[发明专利]一种快速区分葡萄球菌的方法在审
| 申请号： | 201810360633.1 | 申请日： | 2018-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN108715886A | 公开（公告）日： | 2018-10-30 |
| 发明（设计）人： | 朱荣进;黄任;杨春 | 申请（专利权）人： | 江苏华创检测技术服务有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/14 | 分类号： | C12Q1/14;C12P7/06;G01N30/02;C12R1/445;C12R1/44 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 226000 江苏省南通*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速区分葡萄球菌的方法,包括如下步骤：步骤一、胰蛋白胨大豆肉汤培养基配制；步骤二、测定步骤：a.金黄色葡萄球菌培养、b.葡萄球菌发酵产物处理、c.采用气相色谱条件进行检测、d.结果判断。本发明利用新的气相色谱检测方法，突破了传统生化检测葡萄球菌耗时长，金黄色葡萄球菌和沃氏葡萄球菌生物学形态相似的缺点，能够快速精准地区分出葡萄球菌。 | ||
| 搜索关键词： | 葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 胰蛋白胨大豆肉汤 气相色谱检测 气相色谱条件 培养基配制 生物学形态 发酵产物 结果判断 快速精准 生化检测 耗时 检测 | ||
【主权项】：
1.一种快速区分葡萄球菌的方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤一、胰蛋白胨大豆肉汤培养基配制：称取胰蛋白胨17g，植物蛋白胨3g，氯化钠5g，葡萄糖2.5g，磷酸氢二钾2.5g，加入1000ml蒸馏水，分装到500ml锥形瓶中，在120℃的灭菌锅内湿热灭菌20min即得；步骤二、测定步骤：a.金黄色葡萄球菌培养将金黄色葡萄球菌接种到装有225ml的胰蛋白胨大豆肉汤培养基的无菌锥形瓶中，震荡均匀，在35℃，120r/min的恒温摇床中培养18‑24h；b.葡萄球菌发酵产物处理将培养完成的金黄色葡萄球菌在8000r/min的条件下离心10min，取得上清液，取2.5ml上清液加入2.5ml二硫化碳，静置分层后取二硫化碳液体进行检测。同样以胰蛋白胨大豆肉汤培养基为空白，取2.5ml培养基加入2.5ml二硫化碳，静置分层后取二硫化碳液体作为空白对照；c.采用气相色谱条件进行检测采用如下气相色谱条件进行检测：色谱柱：TG‑WAXMS毛细管色谱柱：30m×0.25mm×0.25μm；温度为：柱箱恒温40℃保持1min，以每分钟10℃的速率升温至80℃；分流进样5:1；隔垫吹扫3ml/min，进样口220℃，检测器230℃；载气为高纯氮，载气流速1.2ml/min；进样量(μl)：1.0；d.结果判断若样品中能够检测到乙醇，则说明该菌株为金黄色葡萄球菌。
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