[发明专利]一种高效NK细胞培养方法在审
| 申请号： | 201810331464.9 | 申请日： | 2018-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN108504636A | 公开（公告）日： | 2018-09-07 |
| 发明（设计）人： | 王晓冰 | 申请（专利权）人： | 上海锦映生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N5/078;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201207 上海市浦东新区中国*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效NK细胞培养方法，本发明的培养方法分离培养的NK细胞的数量足，扩增快，一般外周血培养15天，能够达到70亿个细胞；本发明通过培养基中添加乙酰化α葡聚糖作为激活调动剂，成功激活了NK细胞，促使其分泌IL2、IL12和IFN‑γ，而IL2、IL12和IFN‑γ在NK细胞活化后维持其活性和扩增速率起到关键的作用，使其更具有临床应用价值；此外，本发明方法获得NK细胞的纯度高，对流式细胞仪的检测结果进行分析，发现CD3‑CD56+的NK细胞数达到80％以上，满足临床应用的要求。 | ||
| 搜索关键词： | 临床应用 激活 细胞 分离培养 检测结果 培养基 对流式 葡聚糖 外周血 乙酰化 分泌 活化 扩增 增速 分析 成功 发现 | ||
【主权项】：
1.一种高效NK细胞培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：稀释单克隆抗体CD16和CD2获得抗体稀释液，然后用抗体稀释液过夜包被细胞培养容器；步骤2：分离单个核细胞；步骤3：将步骤2获得的单个核细胞接种到培养容器中，从接种时间开始计时，每隔3天更换新鲜的细胞培养基，培养18天后收集细胞；所述的细胞培养基中含有乙酰化α葡聚糖。
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