[发明专利]一种连续提取纯化生姜多酚的方法

摘要

本发明公开了一种连续提取纯化生姜多酚的方法，先采用酶‑超声法联合提取生姜多酚，经过超滤法纯化后采用AB‑8大孔树脂吸附，再依次利用聚酰胺柱、硅胶柱、Sephadex LH‑20凝胶胶柱继续层析纯化，对样品经冷冻干燥得纯化样品。本发明的方法制备的生姜多酚纯化样品经紫外扫描和GC‑MS分析得到多酚的最大吸收波长为281nm，GC‑MS分析证实纯化物中主要含有6‑姜酚66.38％、8‑姜酚3.12％、Z‑6‑姜烯酚2.06％、8‑姜烯酚1.93％、柠檬醛2.53％、癸醛9.35％(为生姜酚的加热降解产物)，本发明的方法制备的生姜多酚纯度高达85.37％。

主权项

1.一种连续提取纯化生姜多酚的方法，其特征在于，包括如下步骤：酶‑超声法联合提取生姜多酚；超滤法纯化；柱层析法连续纯化；冷冻干燥得到生姜多酚纯化物；具体步骤如下：(一)所述的酶‑超声法联合提取生姜多酚，方法如下：(1)生姜切丝，加入纤维素酶，酶解，收集上清液；(2)将步骤(1)剩余的姜渣加入80％乙醇溶剂，超声提取两次，收集上清液，减压回收溶剂；(3)合并两次上清液。(二)所述的超滤法纯化，方法如下：将酶‑超声法联合提取生姜多酚步骤得到的上清液浓度调整为0.5mg/mL，采用30KD的超滤膜进行超滤纯化，收集小于30KD的生姜多酚超滤液；(三)所述的柱层析法连续纯化包括大孔树脂吸附、聚酰胺柱纯化、硅胶柱纯化、Sephadex LH‑20凝胶胶柱层析纯化，具体方法如下：(1)大孔树脂吸附：将10g AB‑8大孔树脂装柱，取生姜多酚在上样流速1mL/min条件下进行吸附，用70％的乙醇溶液进行洗脱；(2)聚酰胺柱纯化：将大孔树脂吸附得到的洗脱液导入聚酰胺柱中继续层析纯化，流动相为50％乙醇，缓慢加入，洗脱完毕，得聚酰胺柱纯化生姜多酚液，浓缩；(3)硅胶柱纯化：将得到的生姜多酚聚酰胺浓缩液进行硅胶柱层析，以石油醚与乙酸乙酯作为洗脱剂洗脱，得到生姜多酚硅胶纯化液；(4)Sephadex LH‑20凝胶胶柱层析纯化：将生姜多酚硅胶纯化液利用Sephadex LH‑20凝胶胶柱层析继续纯化，以氯仿与乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱，通过旋蒸去除洗脱液，得到生姜多酚纯化液；(四)冷冻干燥：将上述得到的生姜多酚纯化液经冷冻干燥即得到生姜多酚纯化物。