[发明专利]一种林蛙卵蛋白低聚肽的工业化生产工艺

摘要

本发明提供了一种林蛙卵蛋白低聚肽的工业化生产工艺。具体步骤如下：1、原料、2、浸泡软化、3、绞碎、4、脱脂、5、磨浆、6、脱色、7、盐析、8、压滤、9、酶解、10、超滤低聚肽、11、压滤截留浓缩、脱盐、脱杂质、12、除菌、13、灌装、14、冷冻干燥、15、压瓶盖塞、贴标签。本发明方法工艺简单、设计合理,充分利用自然资源，可实现工业化和规模化生产。本发明采用食品级蛋白酶水解，安全性高，无副作用；本发明可作为保健品、功能食品添加剂或营养食品直接服用，同时还可以作为化妆品添加剂安全使用。

主权项

1.一种林蛙卵蛋白低聚肽的工业化生产工艺，其特征在于步骤如下：（1）原料原料选用林蛙卵；（2）浸泡软化注水浸泡48h‑72 h；（3）绞碎绞碎成粒度为0.1‑0.2cm的碎块；（4）脱脂将绞碎林蛙卵用1.0‑2.0%醋酸溶液的脱脂液浸泡脱脂1‑2d,最后用30‑50℃温水漂洗2次,获得脱脂浸泡的林蛙卵；（5）磨浆磨成颗粒在20～50μm磨浆液；（6）脱色在磨浆液中加入液体重量的3‑5%的活性炭,使得活性炭充分吸附，获得脱色的磨浆液；（7）盐析将制得的磨浆液调节pH值4.0～4.5，加入NaCl粉末进行盐析，静置12～24h，获得胶原混合液；（8）压滤将混合液均匀铺设到板框滤布上，输送混合液开始压滤1～6h，弃去滤饼，得到透明的滤液；（9）酶解将压滤后的浆液先加入浆液重量0.1‑2％的胃蛋白酶，调节pH至pH 2～3，在40‑45℃温度条件下，使酶解反应72h后；再加入浆液重量0.5%～1%的木瓜蛋白酶,在40‑45℃，调节pH至pH6‑8，酶解反应5‑10小时，不断地搅拌，得到含有低聚肽混合液；（10）超滤低聚肽将酶解液经反渗透超滤机组进行分级超滤，先经过分子量75KDa的超滤器，再经过分子量3KDa的超滤器过滤；合适分子量片段的肽透过膜进入收集器，大片段的肽继续和酶作用再酶解，再超滤获得低聚肽过滤液；超滤后将其温度升温至80～95℃进行高温灭酶；（11）纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质将蛋白低聚肽滤液泵入反渗透纳滤机组的分子量为500Da的纳滤器中进行浓缩；再将浓缩液加同样的体积水洗脱3‑5次，获得浓缩至含水量仅有3‑5%的最小体积的纳滤截留液；将收集含有原料中的其他物质及无机盐等纳滤过滤液，进行净化处理，收集的纳滤截留液为低聚肽浓缩液；（12）除菌将浓缩液采用分子量60‑80KDa中空纤维超滤器过滤后，再进入0.22μm微孔滤芯进行过滤，通过截留的方式进行除菌；（13）灌装用西林瓶灌装；（14）冷冻干燥（1）预冻固化将罐装浓缩液西林瓶，摆放在真空冷冻干燥机物料箱内的隔板上，预冻固化温度‑30～‑45℃，并保持5～8h，使浓缩液中水分充分冻结，确保无液体存在；（2）升华干燥：冻干机启动真空系统，将仓内压力抽至30～50pa，采取缓慢升温,以每小时1℃的升温速率,缓慢升温到‑20～‑25℃,保温6～8h,再以每小时2℃的升温速率,缓慢升温到‑10℃～‑12℃,保温3～6h，进行升华干燥；（3）解析干燥：升华干燥后，再以每小时3℃的升温速率,缓慢升温到40～50℃,压力为10～20Pa；保温6～8h, 完成解析干燥冻干；（15）压瓶盖塞、贴标签冷冻干燥后在无菌条件下机械压瓶盖塞，进入贴标机使其贴好标签；制成蛋白纯度高达99.5%、相对分子质量小于1000Da的低聚肽成份含量平均大于85%的林蛙卵低聚肽成品粉。