[发明专利]一种金纳米棒金纳米簇复合物快速检测试剂盒的制备方法

摘要

本发明公开了一种金纳米棒金纳米簇复合物快速检测试剂盒的制备方法。将准备好的金纳米棒溶液与11‑巯基十一烷酸作用；再离心分散后加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺活化；将活化好的金纳米棒溶液与谷胱甘肽还原法制备的金纳米簇溶液作用，再离心分散；将上一步所得金纳米棒金纳米簇复合纳米材料与前列腺癌DNA适配体相连接；在溶液中分别加入不同浓度的前列腺癌特异性抗原反应；并均加入显色剂和双氧水显色，将溶液体系环境调节至酸性，置于氙灯光照条件下反应，PSA浓度的不同，显色剂呈现的颜色也不一样，根据显色剂在波长650nm处的吸光度值与PSA浓度的关系，能计算得到待测样品中PSA的含量。

主权项

1.一种金纳米棒金纳米簇复合物快速检测试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)首先制备好金纳米棒溶液，将金纳米棒溶液在离心机上以10000rpm离心10分钟，去除上清液，再用二次蒸馏水进行分散后备用；(2)依据金纳米棒上的金与巯基化合物可形成金硫化学键，将离心好的金纳米棒溶液与11‑巯基十一烷酸(MUA)作用12小时；(3)将步骤(2)所得溶液在离心机上以6000rpm的转速离心15分钟，去除上清液后，再用二次蒸馏水进行分散，然后加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化15分钟；(4)将步骤(3)活化好的金纳米棒溶液与谷胱甘肽还原法制备的金纳米簇溶液作用30分钟，再以6000rpm转速离心15分钟，然后用二次蒸馏水进行分散，即可得到金纳米棒金纳米簇复合纳米材料；(5)将步骤(4)得到的金纳米棒金纳米簇复合纳米材料通过金硫化学键与带巯基的前列腺癌DNA适配体(PSA‑aptamer)相连接；(6)依据前列腺癌DNA适配体(PSA‑aptamer)与前列腺癌特异性抗原(PSA)的特异性结合，在步骤(5)所得溶液中分别加入不同浓度的前列腺癌特异性抗原(PSA)，反应20分钟；(7)在步骤(6)所得溶液中均分别加入显色剂(TMB)和双氧水(H2O2)显色，并将溶液体系环境调节至酸性，置于氙灯光照条件下反应，当金纳米棒表面自由电子与入射光波长一致时，可产生局域表面等离子体共振，从而加快显色反应，根据PSA浓度的不同，覆盖金纳米棒金纳米簇复合纳米材料表面金纳米簇的面积不一样，使得未被PSA覆盖的金纳米棒金纳米簇复合纳米材料表面的金纳米簇催化分解双氧水产生羟基自由基的量也会不一样，羟基自由基可以氧化TMB，进而使显色剂呈现的颜色也不一样，再根据显色剂(TMB)在波长650nm处的吸光度值与PSA浓度的关系，能计算得到待测样品中PSA的含量。