[发明专利]一种利用HPLC-MS建立新疆阿魏多糖指纹图谱的方法

摘要

本发明涉及一种利用HPLC‑MS建立新疆阿魏多糖指纹图谱的方法。本发明采用HPLC‑MS技术建立新疆阿魏指纹图谱的方法将色谱的分离功能与质谱的定性功能结合使用，大大提高质量检测的准确性和灵敏度。而且本发明首次建立新疆阿魏水溶性多糖的定量指纹图谱，不仅可以利用质谱对共有峰进行准确定性，还可以通过提取离子色谱图准确计算各峰峰面积进行定量，从两个层面建立指纹图谱更具有效性。本发明的方法灵敏度高，专属性强，可作为新疆阿魏药材的鉴别和质量评价的重要手段之一。

主权项

1.一种利用HPLC‑MS建立新疆阿魏多糖HPLC‑MS指纹图谱的方法，包括下列步骤：(1)制备单糖标准品溶液；(2)将步骤(1)制备的单糖标准品溶液使用PMP(1‑苯基‑3‑甲基‑5‑吡唑啉酮)进行衍生化得到不同单糖衍生化后的标准品溶液，并取衍生化后的单糖溶液制备标准品混合溶液(即混合标样)；(3)分别对不同批次新疆阿魏进行提取，得到新疆阿魏多糖；(4)将步骤(3)提取的新疆阿魏多糖进行水解，得到单糖；(5)将步骤(4)水解的产物使用步骤(2)相同的PMP衍生化步骤进行衍生化；(6)使用HPLC‑MS对步骤(2)制备得到的不同单糖衍生化后的标准品溶液和混合标样进行分析，根据各单糖衍生化后的标准品溶液的色谱峰对混合标样中的色谱峰进行定性，并绘制混合标样中各单糖的浓度‑峰面积标准曲线；(7)使用HPLC‑MS对步骤(5)衍生化的新疆阿魏多糖样品进行分析，比较各批次得到的色谱图，确定共有特征峰，并将各批次的新疆阿魏多糖图谱数据用平均数法生成指纹图谱共有模式，并以此共有模式为新疆阿魏HPLC‑MS指纹图谱，将上述得到的HPLC‑MS指纹图谱与步骤(6)各单糖标准品色谱图对比，对共有特征峰进行定性分析，并利用标准曲线对共有特征峰进行定量分析。