[发明专利]柚皮苷微球丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架及其制备方法

摘要

本发明公开了一种复合支架，制备原料包括柚皮苷、明胶微球、羟基磷灰石、丝素蛋白，复合支架由以下步骤制备而成：1)往明胶微球，滴加0.5‑1g/ml柚皮甘溶液，然后于2‑8℃中放置过夜后；进行冷冻干燥，便得到柚皮甘/明胶微球复合物；2)将羟基磷灰石、柚皮甘/明胶微球复合物与3.5wt％‑10wt％SF溶液混合后，注射于孔板中，随后，将该样品冷冻干燥，得到NG/GMs/HA/SF复合支架，本发明将应用传统的SF/HAp复合支架负载传统中药单体并应用符合骨微环境的明胶微球进行包裹,促进OVF的愈合且增强骨折椎体的力学强度，具有良好的流变性、易塑性、生物力学强度、以及较好的促成骨性能，从而能够适用于形状各异的骨缺损区，且效果持久，具有较强的骨组织修复能力，便于规模化推广应用。 1

主权项

1.一种复合支架，其特征在于，所述复合支架的制备原料包括柚皮苷、明胶微球、羟基磷灰石、丝素蛋白。

2.根据权利要求1所述的复合支架，其特征在于，所述柚皮苷、明胶微球、羟基磷灰石、丝素蛋白的质量比为(2‑4)：(1‑2)：(1‑2)：(7‑20)。

3.根据权利要求1所述的复合支架，其特征在于，所述复合支架由以下步骤制备而成：

1)往明胶微球，滴加0.5‑1g/ml柚皮甘溶液，然后于2‑8℃中放置过夜后；进行冷冻干燥，得到柚皮甘/明胶微球复合物；

2)将羟基磷灰石、柚皮甘/明胶微球复合物与3.5wt％‑10wt％SF溶液混合后，注射于孔板中，随后，将该样品冷冻干燥，得到NG/GMs/HA/SF复合支架。

4.一种如权利要求1至3任一项所述的复合支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)往明胶微球，滴加0.5‑1g/ml柚皮甘溶液，然后于2‑8℃中放置过夜后；进行冷冻干燥，得到柚皮甘/明胶微球复合物；

2)将羟基磷灰石、柚皮甘/明胶微球复合物与3.5wt％‑10wt％SF溶液混合后，注射于孔板中，随后，将该样品冷冻干燥，得到NG/GMs/HA/SF复合支架。

5.根据权利要求4所述的复合支架的制备方法，其特征在于，所述明胶微球的球径为20‑40μm。

6.根据权利要求4所述的复合支架的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中明胶微球采用以下方法制备：将0.05～0.1g山梨糖醇酐油酸酯加到盛有100ml植物油的烧瓶中于40‑60℃水浴加热搅拌0.5‑2h，混合均匀后。滴加10ml 5‑10wt％明胶水溶液，持续搅拌3h后，将混合溶液转移至冰浴搅拌30min。然后加入0.1‑1ml，2.5‑25wt％戊二醛水溶液，继续搅拌2‑4h后，加入30‑100ml，4℃的丙酮，搅拌30min后，静置，过滤，便可以得到明胶微球；将微球泡在10‑50ml丙酮中，放置于4℃的冰箱中，固化24h后用1mol/L氨基乙酸浸泡30min；然后，离心，取沉淀，洗涤沉淀物，将清洗后得到的明胶微球置于去离子水中，于浸泡过夜，冷冻干燥，得到明胶微球。

7.根据权利要求4所述的复合支架的制备方法，其特征在于，所述丝素蛋白溶液由蚕茧中提取。

8.根据权利要求4所述复合支架的制备方法，其特征在于，所述柚皮苷溶液的制备方法为将柚皮苷溶解于1ml的乙醇中，得到浓度为0.5‑1g/ml的柚皮苷/乙醇溶液。

9.根据权利要求4所述复合支架的制备方法，其特征在于，所述羟基磷灰石的制备方法为：将100ml，0.3mol/L的磷酸氢二铵水溶液滴加到100ml0.5mol/L的硝酸钙溶液中，机械搅拌，并且同时60‑80℃水浴加热/2h。在搅拌反应过程中，pH值维持在10，反应结束后，在室温下陈化24h，然后通过离心收集，并且用去离子水清洗，最后，将收集到的纳米颗粒，进行冷冻干燥，便可以得到纳米羟基磷灰石颗粒。

10.根据权利要求4所述的复合支架的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中冷冻干燥条件为‑60℃冷冻干燥24h。