[发明专利]一种基于引物生成型滚环扩增技术的端粒酶活性检测方法在审
申请号: | 201810160144.1 | 申请日: | 2018-02-26 |
公开(公告)号: | CN108359716A | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
发明(设计)人: | 张春阳;马飞;魏树花 | 申请(专利权)人: | 山东师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844;C12Q1/48 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 王志坤 |
地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供一种基于引物生成型滚环扩增(PG‑RCA)技术的端粒酶活性检测方法,设计一个探针,端粒酶存在时,探针3'端不断增加端粒(TTAGGG)n扩展,并与反向引物结合,在phi29 DNA聚合酶和Nb.BbvCI切割酶作用下启动SDA反应并生成RCA引物,RCA引物和圆形模板(CT)结合,在phi29 DNA聚合酶和Nb.BbvCI切割酶作用下触发线性RCA反应并生成新RCA引物,新RCA引物又与新CT结合,触发新一轮RCA反应,最终产生大量核酸扩增产物,被荧光染料SYBR Gold检测。该方法将检测信号两步放大具有超高的灵敏度,检测限低至3个Hela细胞,操作简单,无需繁琐的洗涤分离步骤。 | ||
搜索关键词: | 引物 检测 端粒酶活性 滚环扩增 切割酶 触发 探针 成型 核酸扩增产物 反向引物 检测信号 洗涤分离 荧光染料 圆形模板 端粒酶 灵敏度 端粒 放大 | ||
【主权项】:
1.一种探针在基于引物生成型滚环扩增技术检测端粒酶活性方法中的应用,其特征在于,所述探针序列为SEQ ID NO.1。
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