[发明专利]一种利用多拷贝基因共表达杆状病毒外源蛋白的构建和表达方法有效
| 申请号： | 201810084751.4 | 申请日： | 2018-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN108018264B | 公开（公告）日： | 2021-04-27 |
| 发明（设计）人： | 刘阳坤;姚伦广;李娜;胡小敏;王铁军;谷娟娟;尹延震 | 申请（专利权）人： | 南阳师范学院 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/67;C12N15/66;C12N15/866 |
| 代理公司： | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人： | 陆菊华 |
| 地址： | 473061 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用多拷贝基因共表达杆状病毒外源蛋白的构建和表达方法，是以萤火虫荧光素酶Fluc基因为目的基因，分别构建多角体polh启动子和p10启动子控制的含有1‑3个基因拷贝数的重组杆状病毒，再感染SF9细胞系，感染后收集细胞检测萤火虫荧光素酶的活性。本发明的有益效果为：本发明提供的方法，经过检测发现，与未改造的杆状病毒相比，萤火虫荧光素酶基因表达量明显增加2‑5倍，有效提高了外源基因在杆状病毒系统中的表达量，适用于生产具有天然活性的蛋白质，其具有十分重要的意义，为利用杆状病毒多基因表达系统进行生产提供了一种新的构建重组病毒策略，实现了外源基因在杆状病毒多基因表达系统中的高效表达。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 拷贝 基因 表达 杆状病毒 蛋白 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用多拷贝基因共表达杆状病毒外源蛋白的构建和表达方法，其特征在于，是以萤火虫荧光素酶Fluc基因为目的基因，分别构建多角体polh启动子和p10启动子控制的含有1-3个基因拷贝数的重组杆状病毒，再使用重组杆状病毒感染SF9细胞系，在感染后48小时到96小时收集细胞检测萤火虫荧光素酶的活性。
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