[发明专利]一种利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法

摘要

本发明属于有机污染物处理技术领域，公开了一种利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，本发明根据过氧化物酶催化酚类物质氧化反应原理，采用人工加入氧化剂过氧化氢，由过氧化物酶催化清除有机物NP，提出一种应用厚朴叶片粗酶液降解NP的方法。厚朴作为中国传统的药用植物而广泛栽植于中国鄂西南山区，资源丰富，其叶片比较容易获得；酶促反应具有催化效率高、反应条件温和、可调节性等特点，应用厚朴叶片粗酶液分解NP可以大大提高分解NP的效果，同时其对于其他的一些酚类化合物也有非常好的清除效果，具有成本低、绿色、安全、无污染特性。 1

主权项

1.一种利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法包括：

步骤一，称取成熟厚朴树叶，按照1：5料液比加入含2％聚乙烯吡咯烷酮和2mmol/L乙二胺四乙酸的柠檬酸‑磷酸缓冲液，4℃匀浆，4层纱布过滤，滤液在4℃下，12000g离心20min，弃沉淀，保留上清液；

步骤二，在上清液中加入硫酸铵，达到20％饱和度，沉淀过夜，离心，弃去沉淀，取上清液，继续加入硫酸铵，取60％～90％饱和度部分的沉淀，以适量纯水溶解后即为粗酶液；

步骤三，移取缓冲溶液，控制反应体系温度为10～50℃，pH值为3～11，加入适量粗酶液，使反应体系中NP浓度为10～20μmol/L，加入摩尔浓度为NP10～100倍的H₂O₂启动反应，反应时间为180min；于反应开始1min、3min、5min、15min、45min、90min、120min、180min从上述反应体系中取样1ml，加入2mL甲醇终止反应，实现厚朴叶片粗酶液对NP的降解；在终止反应液里加入适量明矾，摇匀，过夜沉淀后5000g离心10min；离心后的上清液过0.22μm滤膜后，采用液相色谱质谱联用仪检测，流动相为80％甲醇/水，质谱检测准分子离子峰对应的相对分子质量为219.18。

2.如权利要求1所述的利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述步骤一厚朴叶提取液中为有聚乙烯吡咯烷酮、乙二胺四乙酸的柠檬酸—磷酸缓冲液。

3.如权利要求1所述的利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述步骤一缓冲溶液为醋酸—醋酸钠缓冲溶液、硼砂缓冲溶液、柠檬酸—磷酸缓冲液中的任一种。

4.如权利要求1所述的利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述pH值为7。

5.如权利要求1所述的利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述NP初始浓度为10～20μmol/L。

6.如权利要求1所述的利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述温度为室温。

7.如权利要求1所述的利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述反应时间为180min。

8.如权利要求1所述的利用厚朴叶片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述酶加入量为60U/ml。