[发明专利]低粘度抗原结合蛋白及其制备方法

摘要

本发明涉及一种用于制备粘度降低的抗原结合蛋白的方法。该方法通过用相关低粘度亚家族中的残基替换高粘度可变域亚家族中的残基来进行。该方法进一步包括用与低粘度相关的残基置换Fc域中的残基并将带电荷的残基添加到该Fc域的C端。本发明进一步涉及通过该方法产生的抗原结合蛋白。

主权项

1.一种降低抗原结合蛋白的粘度的方法，该方法包括在该抗原结合蛋白的序列中进行一种或多种选自以下的修饰：a. 如果该抗原结合蛋白包含VH1|1‑18种系亚家族，则修饰VH1序列以包含选自82X¹、94X²和95X³的一个或多个置换，其中X¹选自R、K和H，X²选自S、T、N和Q，并且X³选自R、K和H；b. 如果该抗原结合蛋白包含VH3|3‑33种系亚家族，则修饰VH3序列以包含选自1X⁴、17X⁵和85X⁶的一个或多个置换，其中X⁴选自D和E，X⁵选自G、A、V、I、L和M以及W，并且X⁶选自G.A、V、I、L和M；c. 如果该抗原结合蛋白包含VK3|L16种系亚家族，则修饰VK3序列以包含选自4X¹⁰、13X¹¹、76X¹²、78F、95X¹³、97X¹⁴和98P的一个或多个置换，其中X¹⁰选自G、A、V、I、L和M，X¹¹选自G、A、V、I、L和M，X¹²选自D和E，X¹³选自R、K和H，并且X¹⁴选自D和E；d. 如果该抗原结合蛋白包含VK3|L6种系亚家族，则修饰VK3序列以包含选自76X¹²和95X¹³的一个或多个置换；e. 修饰Fc域序列以包含选自253X¹⁵、440X¹⁶和439X¹⁷的一个或多个置换，其中X¹⁵选自G、A、V、I、L和M，X¹⁶选自R、K和H，并且X¹⁷选自D和E，其中该Fc域序列仅包含440X¹⁶和439X¹⁷中的一种；以及f. 修饰该Fc域序列的C端以包含X¹⁸X¹⁹，其中X¹⁸是选自D和E或选自H、K和R的1至4个氨基酸，并且X¹⁹选自P、M、G、A、V、I、L、S、T、N、Q、F、Y和W且当X18包含D或E时不存在、当X¹⁸在其C末端包含K或R时存在并且当X¹⁸在其C末端包含H时存在或不存在；其中分段a、b、c和d中的氨基酸根据Aho编号系统编号，并且分段e中的氨基酸根据EU编号系统编号。