[发明专利]低粘度抗原结合蛋白及其制备方法

权利要求书

1.一种降低抗原结合蛋白的粘度的方法，该方法包括在该抗原结合蛋白的序列中进行一种或多种选自以下的修饰：

a. 如果该抗原结合蛋白包含VH1|1-18种系亚家族，则修饰VH1序列以包含选自82X¹、94X²和95X³的一个或多个置换，其中X¹选自R、K和H，X²选自S、T、N和Q，并且X³选自R、K和H；

b. 如果该抗原结合蛋白包含VH3|3-33种系亚家族，则修饰VH3序列以包含选自1X⁴、17X⁵和85X⁶的一个或多个置换，其中X⁴选自D和E，X⁵选自G、A、V、I、L和M以及W，并且X⁶选自G.A、V、I、L和M；

c. 如果该抗原结合蛋白包含VK3|L16种系亚家族，则修饰VK3序列以包含选自4X¹⁰、13X¹¹、76X¹²、78F、95X¹³、97X¹⁴和98P的一个或多个置换，其中X¹⁰选自G、A、V、I、L和M，X¹¹选自G、A、V、I、L和M，X¹²选自D和E，X¹³选自R、K和H，并且X¹⁴选自D和E；

d. 如果该抗原结合蛋白包含VK3|L6种系亚家族，则修饰VK3序列以包含选自76X¹²和95X¹³的一个或多个置换；

e. 修饰Fc域序列以包含选自253X¹⁵、440X¹⁶和439X¹⁷的一个或多个置换，其中X¹⁵选自G、A、V、I、L和M，X¹⁶选自R、K和H，并且X¹⁷选自D和E，其中该Fc域序列仅包含440X¹⁶和439X¹⁷中的一种；以及

f. 修饰该Fc域序列的C端以包含X¹⁸X¹⁹，其中X¹⁸是选自D和E或选自H、K和R的1至4个氨基酸，并且X¹⁹选自P、M、G、A、V、I、L、S、T、N、Q、F、Y和W且当X18包含D或E时不存在、当X¹⁸在其C末端包含K或R时存在并且当X¹⁸在其C末端包含H时存在或不存在；

其中分段a、b、c和d中的氨基酸根据Aho编号系统编号，并且分段e中的氨基酸根据EU编号系统编号。

2.如权利要求1所述的方法，其中该抗原结合蛋白除被置换外还包含选自图1A和图1B的抗体的序列（SEQ ID NO: 166和168；2和4；178和180；170和172；6和8；10和12；14和16；18和20；22和24；26和28；30和32；34和36；38和40；43和44；46和48；50和52；54和56；58和60；62和64；66和68；70和72；74和76；78和80；82和84；86和88；90和92；94和96；98和100；102和104；106和108；110和112；114和116；118和120；122和124；126和128；130和132；134和136；158和160；138和140；142和144；146和148；150和152；以及154和156）。

3.如权利要求1所述的方法，该方法包括修饰包含该VH1|1-18种系亚家族的抗原结合蛋白的VH1序列，以包含选自82R、94S和95R的一个或多个置换。

4.如权利要求2所述的方法，该方法包括修饰包含该VH1|1-18种系亚家族的抗原结合蛋白的VH1序列，以包含置换82R、94S和95R。